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小鼠β细胞素(Betacellulin)检测试剂盒

型    号:
所属分类:小鼠ELISA试剂盒
报    价: 市场价:1280
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小鼠β细胞素(Betacellulin)检测试剂盒采用夹心法酶联免疫吸附法,用于体外定量分析小鼠血清、血浆、细胞裂解液或细胞培养上清中Betacellulin的含量。预先包被的抗体是Betacellulin单克隆抗体。检测相抗体是Betacellulin单克隆抗体,经生物素标记。样品和生物素标记抗体先后加入酶标板孔反应后,PBS或TBS洗涤。随后加入过氧化物酶标记的亲和素反应;

小鼠β细胞素(Betacellulin)检测试剂盒产品概述:

小鼠β细胞素(Betacellulin)检测试剂盒

本试剂盒采用夹心法酶联免疫吸附法,用于体外定量分析小鼠血清、血浆、细胞裂解液或细胞培养上清中Betacellulin的含量。预先包被的抗体是Betacellulin单克隆抗体。检测相抗体是Betacellulin单克隆抗体,经生物素标记。样品和生物素标记抗体先后加入酶标板孔反应后,PBS或TBS洗涤。随后加入过氧化物酶标记的亲和素反应;经过PBS或TBS的彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的小鼠Betacellulin呈正相关。

β细胞素(betacellulin,BTC)是表皮细胞生长因子家族成员之一,在多器官系统的正常发育过程中起重要作用,尤其高表达于胰腺组织中,提示β细胞素可能在胰腺发育和胰腺干细胞的分化中发挥重要作用。

检测指标:Betacellulin;BTC
检测范围:7.8pg/ml~500pg/ml
特异性:系统和其它细胞因子无交叉反应
敏感性:<0.5pg/ml

产品组成:

组分规格数量
预包被抗小鼠Betacellulin抗体的96孔板96T1板
重组小鼠Betacellulin标准品(冻干)10ng/管2管
生物素标记抗小鼠Betacellulin(100X)130μl1管
亲和素-过氧化物酶复合物(ABC)(100X)130μl1管
样品稀释液30ml1瓶
抗体稀释液12ml1瓶
ABC稀释液12ml1瓶
TMB显色液10ml1瓶
TMB终止液10ml1瓶
洗涤缓冲液(25X)20ml1瓶
封板膜 4张



储存条件:2-8℃(频繁使用时),-20℃(长时间不用时)
有效期:6个月(4℃);12个月(-20℃)

参考标准曲线数据:(取自某一批次质检数据,仅供参考,用户需要自己建立标准曲线)

浓度(pg/ml)07.815.631.362.5125250500
OD值0.1000.1180.1280.1710.2530.4210.8371.801
 

小鼠β细胞素(Betacellulin)检测试剂盒原理:

 

问:请问标曲是每次都要做吗?

 

答:是的,每次实验,孵育时间,洗板次数等等条件均不一样,不同实验的标曲不能混用,做一次实验需要做一次标准曲线,并且用当次,同一块板上的标准曲线结果去计算板内样品的浓度,才能得到准确的结果。

问:做预实验时每种要做几个复孔呀?

 

答:预实验视情况而定,如果整个板子孔数较为充足,建议两个复孔,如不充足,单孔也可以。要尽量保证实验过程中加样准确。

问:血清样本少量溶血,颜色稍深,对结有影响吗?

 

答:会有影响,建议取样时需注意,避免溶血、脂血等样本。如样本条件受限,建议用样本稀释液适当稀释,减少基质效应影响。

问:试剂盒有推荐稀释浓度还需要自己测吗?

 

答:试剂盒一般会给出不同样品的推荐稀释比例,但是为大致范围,还是根据自己的样本情况,设计预实验测量计算。

问:加完终止液之后测的几次数据差别也蛮大?

 

答:加完终止液后,显色反应也不是永远停止,形成的黄色颜色会随着时间延长继续加深,建议在15 min内读数。

问:副孔差别比较大,是没洗干净吗?

 

答:复孔值差异较大,主要原因应考虑加样是否准确,洗板过程中是否有残留以及是否有交叉污染。

问:配好的抗体没用完如何保存,可保存多久?预实验用了一个试剂盒里面的部分板子和试剂,剩下的板子和试剂还能继续用于正式实验吗?

 

答:一般来讲,配好的母液,可以在四度保存,多一个月左右。剩下的板子和试剂是可以继续用于正式实验的,间隔时间不要太长,一个月之内均可,需注意试剂避免污染,板子保持干燥。

问:后显示的OD值在多少之间属于可用值,有要求吗?

 

答:有的,建议标准曲线高浓度点的OD值在2.0左右较好,也可参考说明书标曲的数据。

问:样本总是在标准曲线之外,稀释100倍也是,怎么办?

 

答:在设置稀释倍数之前,需要参考相关文献,对于一些表达极高的蛋白,确实会出现这种情况,建议继续提高稀释比例。

问:试剂盒推荐用450和540nm双波长检测,但条件有限可否换成450和620的双波长?如何使用校准波长?还有,用空白孔校准可以么?

 

答:可以的,TMB底物显色后,吸光峰值在450nm,另外的校准波长是防止气泡等杂质造成的干扰设置,避开450左右50nm以上即可。两次读取的OD值,用OD450 - OD校准波长即可。尽量还是建议有条件的选用双波长校准的方法,因为避免了不同孔的读数影响,防止出现空白孔污染,导致读数较高,无法校准的情况。

问:ELISA可以检测胞内蛋白么?

 

答:可以的,选用支持组织匀浆的ELISA试剂盒即可,将组织样品或细胞样品进行裂解,提取胞内蛋白后进行蛋白定量,保证每孔上样总蛋白量一致即可。

问:ELISA试剂盒显色液是双组份的,有些其他品牌的是单组分的,使用单组分的有影响么?

 

答:HRP酶标二抗的ELISA试剂盒,显色底物一般为TMB,TMB不稳定,曝光或污染氧化后会出现显色反应,导致实验背景升高,或无法使用,所以爱必信的ELISA试剂盒将显色液调整为双组份,方便稳定保存,仅在使用前混合,避免了TMB的不稳定影响实验结果。如您选用的试剂盒为单组分显色液,在使用前检测是否为无色透明,如果是正常的,对结果也没有影响,可以放心使用。

问:整个过程需要避光吗?避光需要避到什么程度呢?

 

答:ELISA实验中,在酶标抗体孵育,以及显色底物孵育这两步建议避光,其他步骤无需避光。避光可采用锡纸包裹,或将整个ELISA板子放入暗盒或抽屉等无光处即可。

 

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