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禽类支原体通用PCR试剂盒

禽类支原体通用PCR试剂盒是群中等小的双股 DNA 病毒,根据其理化性质分 α、β、γ、未分类疱疹病毒四个亚科。疱疹病毒感染的宿主范围广泛,可感染人类和其他脊椎动物。在自然界广泛存在,主要侵犯外胚层发育而成的组织,例如:皮肤、粘膜和神经组织。

  • 产品型号:50次
  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2020-07-22
  • 访  问  量:384
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详细介绍
品牌其他品牌货号XY-0070
规格50T供货周期一周
主要用途荧光定量PCR具有更高的扩增效率、更高的扩增灵敏度、更高的扩增特异性。应用领域医疗卫生,环保,化工,生物产业,农业

禽类支原体通用PCR试剂盒

Avian Mycoplasma spp.

产品及特点

禽支原体病是由禽类支原体(Avian Mycoplasma spp.)引起的家禽的一 种传染病,主要包括鸡败血支原体病、鸡传染性滑液膜炎和火鸡支原体病。禽 支原体病几乎在世界各地都有发生,已成为鸡群和火鸡群的一个重要问题。危 害的鸡只达 13%以上,使其体重减少 38%,饲料转化率降低 21%。在火鸡中, 可引起窦炎、气囊炎和以高死亡率为特征的传染性窦炎。本试剂盒是根据 PCR 原理开发,具有下列特点: 

1. 免 DNA 制备,直接用裂解液做 PCR,更加简单快捷。

2. 根据禽类支原体保守区设计引物。

3. 特异性高,跟其他微生物无交叉反应。

4. 灵敏高,可检测低至几个拷贝/反应的支原体污染。

5. 提供内参和无感染性的支原体阳性对照(DNA 段),能有效避免实验结 果的假阳性和假阴性。

6. 可用于培养细胞、疫苗、血清、重组蛋白和耗材的污染检测。但不能用于 临床诊断。

7. 本产品足够至少 50 次 40μL 体系 PCR 检测(含阳性对照和阴性对照反应)。

禽类支原体通用PCR试剂盒规格及成分

编号

成分

规格

试剂一

PCR MagicMix 3.0

1 mL(红盖)  

试剂二

超纯水

1 mL(亮黄色) 

试剂三

 禽类支原体通用 PCR 引物混合液

100 μL白盖) 

试剂四

禽类支原体通用 PCR 阳性对照 (1×10E8 拷贝/μL)

50 μL(黄盖)

试剂 天净沙核酸释放剂(试用装) 20 次(1mL、绿盖)

试剂

使用手册

1 份

运输及保存 低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。阳性对照需要单独放置,不要污染其 他试剂。  

自备试剂 样品 DNA。

使用方法 一、样品 DNA 的制备

1. 如果有 N 个样品,必须设置 N+2 个提取,多出的一个是 PC(样品制备阳 性对照),一个是 NC(样品制备阴性对照)。可以用 10μL 阳性对照的 10000 倍稀释液再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样, 以此作为 PC。另外用水作为 NC。

2. 用自选方法纯化样品的 DNA,本试剂盒跟市场上大多数核酸纯化试剂盒兼 容。

二、设置 PCR 反应(40μL 体系)

3. 对 N+2 个样品,在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性 对照,故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分: 

成分

样品管 N+2 个

PCR 阴性 对照管

PCR 阳性 对照 

PCR Magic Mix 3.0 

20 μL

20 μL

20 μLL

禽类支原体通用 PCR 引物混合液

2 μL

2 μL

2 μL

 N+2 个样品 DNA 模板各 18 μL   

PCR 阴性对照(水)

 

  18 μL

 

PCR 阳性对照(禽类支原体通用 PCR 阳性对照的 10000 倍稀释液)    18 μL

4. 按下表设置 PCR 反应:

过程

温度

时间

预变性

95℃

5 min

 

PCR 反应

35个循环

95℃ 

30 sec

55℃ 30 sec

72℃ 

60 sec

 后延伸 72℃ 10 min

 

三、电泳检测

5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在 扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳 性对照必须有 551bp 大小的条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实 验无效。对没有扩增产物的样品,可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。

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