禽类支原体通用PCR试剂盒是群中等小的双股 DNA 病毒,根据其理化性质分 α、β、γ、未分类疱疹病毒四个亚科。疱疹病毒感染的宿主范围广泛,可感染人类和其他脊椎动物。在自然界广泛存在,主要侵犯外胚层发育而成的组织,例如:皮肤、粘膜和神经组织。
联系电话:15221858802
品牌 | 其他品牌 | 货号 | XY-0070 |
---|---|---|---|
规格 | 50T | 供货周期 | 一周 |
主要用途 | 荧光定量PCR具有更高的扩增效率、更高的扩增灵敏度、更高的扩增特异性。 | 应用领域 | 医疗卫生,环保,化工,生物产业,农业 |
禽类支原体通用PCR试剂盒
Avian Mycoplasma spp.
产品及特点
禽支原体病是由禽类支原体(Avian Mycoplasma spp.)引起的家禽的一 种传染病,主要包括鸡败血支原体病、鸡传染性滑液膜炎和火鸡支原体病。禽 支原体病几乎在世界各地都有发生,已成为鸡群和火鸡群的一个重要问题。危 害的鸡只达 13%以上,使其体重减少 38%,饲料转化率降低 21%。在火鸡中, 可引起窦炎、气囊炎和以高死亡率为特征的传染性窦炎。本试剂盒是根据 PCR 原理开发,具有下列特点:
1. 免 DNA 制备,直接用裂解液做 PCR,更加简单快捷。
2. 根据禽类支原体保守区设计引物。
3. 特异性高,跟其他微生物无交叉反应。
4. 灵敏高,可检测低至几个拷贝/反应的支原体污染。
5. 提供内参和无感染性的支原体阳性对照(DNA 段),能有效避免实验结 果的假阳性和假阴性。
6. 可用于培养细胞、疫苗、血清、重组蛋白和耗材的污染检测。但不能用于 临床诊断。
7. 本产品足够至少 50 次 40μL 体系 PCR 检测(含阳性对照和阴性对照反应)。
禽类支原体通用PCR试剂盒规格及成分
编号 | 成分 | 规格 |
试剂一 | PCR MagicMix 3.0 | 1 mL(红盖) |
试剂二 | 超纯水 | 1 mL(亮黄色) |
试剂三 | 禽类支原体通用 PCR 引物混合液 | 100 μL(白盖) |
试剂四 | 禽类支原体通用 PCR 阳性对照 (1×10E8 拷贝/μL) | 50 μL(黄盖) |
试剂五 | 天净沙核酸释放剂(试用装) | 20 次(1mL、绿盖) |
试剂六 | 使用手册 | 1 份 |
运输及保存 低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。阳性对照需要单独放置,不要污染其 他试剂。
自备试剂 样品 DNA。
使用方法 一、样品 DNA 的制备
1. 如果有 N 个样品,必须设置 N+2 个提取,多出的一个是 PC(样品制备阳 性对照),一个是 NC(样品制备阴性对照)。可以用 10μL 阳性对照的 10000 倍稀释液再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样, 以此作为 PC。另外用水作为 NC。
2. 用自选方法纯化样品的 DNA,本试剂盒跟市场上大多数核酸纯化试剂盒兼 容。
二、设置 PCR 反应(40μL 体系)
3. 对 N+2 个样品,在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性 对照,故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分:
成分 | 样品管 N+2 个 | PCR 阴性 对照管 | PCR 阳性 对照 |
PCR Magic Mix 3.0 | 各20 μL | 20 μL | 20 μLL |
禽类支原体通用 PCR 引物混合液 | 各2 μL | 2 μL | 2 μL |
N+2 个样品 DNA 模板 | 各 18 μL | ||
PCR 阴性对照(水) |
| 18 μL |
|
PCR 阳性对照(禽类支原体通用 PCR 阳性对照的 10000 倍稀释液) | 18 μL |
4. 按下表设置 PCR 反应:
过程 | 温度 | 时间 |
预变性 | 95℃ | 5 min |
PCR 反应 (35个循环) | 95℃ | 30 sec |
55℃ | 30 sec | |
72℃ | 60 sec | |
后延伸 | 72℃ | 10 min |
三、电泳检测
5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在 扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳 性对照必须有 551bp 大小的条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实 验无效。对没有扩增产物的样品,可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。
电话