一站式动物mRNA OUT

一站式动物mRNA OUT产品及特点
构建cDNA文库、蛋白质的体外翻译和RT-PCR方法检测稀有的mRNA等研究常
常需要从总RNA中分离mRNA，mRNA只占总RNA的1%左右，但由于带poly(A)尾
巴，所以可以通过与Oligo(dT)纤维素的亲和结合而与其他RNA（如rRNA、tRNA
等）分离开。一站式动物mRNA OUT本产品专门用于从动物组织中提取mRNA，其操作步骤如下：
它具有下列特点：
1. 一站式，由柱式动物RNA提取试剂和mRNA提取试剂两个产品整合而成，即开
即用，非常方便。
2. 一次可以处理50-100 mg的动物组织，能得到约10-15 μ g总RNA，从中可得
0.1-0.5 μ g左右的mRNA。
3. Oligo(dT)纤维素吸附能力强，每克可以吸附50-80 OD的mRNA，相当于
2000-3000 μ g mRNA。
4. mRNA提取过程操作简单，只需要离心就可以完成，免去了常规的灌柱、洗柱
等繁琐操作。
5. 得到的mRNA可以直接用于构建cDNA文库、蛋白质的体外翻译和RT-PCR。
使用及效果
1. 用柱式动物RNA OUT 的方法提取动物总RNA，zui后用50μL洗脱，将两管收集
在一起，共得到100μL总RNA（详见柱式动物RNA OUT 的使用手册）。
2. 从总RNA中纯化mRNA：将0.5 mL 溶液A（结合液）加入到一管装有
Oligo(dT)纤维素的离心管中，放置5分钟后离心吸弃上清后待用。将制备的总RNA
100μL加热到65℃ 5分钟后加入等体积的溶液A，转移到装有Oligo(dT)纤维素的离
心管中，颠倒混匀数次，离心后将上清转移到一个离心管中。用0.5 mL溶液A，混
匀后4℃ 200 g 离心5分钟，小心弃上清。重复上步洗3-5次。用DEPC水洗脱并收
集mRNA。
3. 用微量核酸沉淀剂沉淀mRNA（详见微量核酸沉淀剂使用手册）。
注：所得mRNA只占总RNA的5%左右，很微量很珍贵，一般不宜电泳检测。101210-10    DNA 级 DTT( 二硫代苏糖醇 )    10g    90    2-110
101211-100    DNA 级 EDTA 2Na    100g    90    2-110
101212-100    DNA 级 Guanidine HCl( 盐酸胍 )    100g    90    2-110
101213-100    DNA 级 GuSCN( 异硫氰酸胍 )    100g    90    2-110
101214-50    DNA 级 2-Mercaptoethanol( )    50mL    90    2-110
101215-100    DNA 级 PVP K30( 聚乙烯基吡咯烷酮 K30)    100g    90    2-110
101216-100    DNA 级 Sarkosyl( 十二烷基肌氨酸钠 )    100g    90    2-110
101217-100    DNA 级 SDS( 十二烷基硫酸钠 )    100g    90    2-110
101218-100    DNA 级 Tris Base( 三羟甲基氨基甲烷 )    100g    90    2-110
101219-300    即用型荧光定量 RT-PCR 试剂盒    300 次    5900    5-35
101219-50    即用型荧光定量 RT-PCR 试剂盒    50 次    1090    5-35
101220-100    RNA 级 CTAB ( 十六烷基*基溴化铵 )    100g    190    1-67
101221-10    RNA 级 DTT ( 二硫代苏糖醇 )    10g    190    1-67
101222-1.5    DNA 碱性胶上样液 ,6×    1.5mL    50    3-10