兔色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA试剂盒
产品名称：PEDF试剂盒
产品编号：XY-PEDF-RU
产品规格：96T/48T
检测类型：双抗夹心法
形式：预包被96孔板
检测样本类型：细胞上清液，血清，血浆
上样量：100ul
实验原理
ELISA是以免疫学反应为基础，将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的实验技术。由于抗原、抗体的反应在一种固相载体-聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行，每加入一种试剂孵育后，可通过洗涤除去多余的游离反应物，从而保证试验结果的特异性与稳定性。
样本要求
1、标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20摄氏度保存，但应避免反复冻融。
2、不能检测含NAN3的样品，因NAN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
3、以上是通用的样本处理方法，无法涵盖各种样本，对于一些特殊样本，建议实验人员多参考已发表的文献，自行设计合理的样本处理方法。
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常用问题及解决方法：
标准曲线差：
可能原因 | 解决方案 |
吸取及洗涤不充分 | 充分的吸取及洗涤 |
移液不准确 | 检查和校正移液器 |
精密度低：
可能原因 | 解决方案 |
洗涤不充分 | 按说明书要求充分洗涤和浸泡 |
混匀不充分和吸取试剂不足 | 充分混匀和吸取试剂 |
重复利用吸头、容器和履膜 | 使用加样器要更新新的吸头、使用新的容器和履膜 |
加样不准确 | 检查和校正移液器 |
OD值低：
可能原因 | 解决方案 |
每孔加的试剂量不准确 | 校正移液器，准确加入试剂 |
温育时间不正确 | 保证充足的温育时间 |
温育温度不正确 | 试剂要平衡至室温并保证准确的温育温度 |
酶标记物或底物失效 | 通过混合酶标记物和底物、颜色应 |
没有加入终止液 | 按照说明书实验操作步骤加入终止液 |
超出读数时间读数 | 在说明书推荐的读数时间内读数 |
样本值不准确：
可能原因 | 解决方案 |
不正确的样本储存方式 | 正确储存样本，使用新鲜样本时行实验 |
不正确的样本收集和处理方法 | 采取正确的样本收集和处理方法 |
代测物质在样本中含量低 | 使用新鲜样本，重复实验 |
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标本保存不当 在冰箱中保存过久的标本，血清中IgG可聚合成多聚体、AFP可形成二聚体，在间接法ELISA测定中会导致本底过深、甚至造成假阳性；标本放置时间过长（如一天以上），有时抗原或抗体免疫活性减弱，亦可出现假阴性。为克服上述干扰，人CD14分子(CDl4)检测试剂盒测定的血清标本宜为新鲜采集；如不能立即测定，5天内测定的血清标本可存放于4℃，1周后测定的血清标本应低温冻存；冻存后融解的标本，蛋白质局部浓缩，分布不均，应充分混合后再测定，但混匀时应轻柔，不可强烈振荡。
标本凝集不全 在没有促凝剂和抗凝剂存在的情况下，正常血液采集后1/2~2h开始凝固，18~24h*凝固。临床检验工作中，有时为了争取时间快速检测，常在血液还未开始凝固时即强行离心分离血清，此时的血清中仍残留部分纤维蛋白原，在人CD14分子(CDl4)检测试剂盒测定过程中可以形成肉眼可见的纤维蛋白块，易造成假阳性结果；这类情况于次日复查时因血凝已*，血清中不再有纤维蛋白原存在，故复查结果变为阴性。为避免上述干扰作用，解决的办法是血液标本采集后必须使其充分凝固后再分离血清，或标本采集时用带分离胶的采血管或于采血管中加入适当的促凝剂。
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