一站式全血mRNA OUT

一站式全血mRNA OUT产品及特点
构建cDNA文库、蛋白质的体外翻译和RT-PCR方法检测稀有的mRNA等研究常常
需要从总RNA中分离mRNA，mRNA只占总RNA的1%左右，但由于带poly(A)尾巴，
所以可以通过与Oligo(dT) 纤维素的亲和结合而与其他RNA（如rRNA、tRNA等）分离
开。本产品专门用于从全血中一站式提取mRNA，一站式全血mRNA OUT其操作流程如下：
它具有下列特点：
1. 一站式，是由天恩泽的高效、血液RNA提取试剂和mRNA提取试剂两个产品整
合而成，即开即用，非常方便。
2. 一次可以处理0.5-1.5 mL的全血，能得到约2-3 μg总RNA，其中1-5%为
mRNA。
3. 提供的Oligo(dT)纤维素吸附能力强，每克可以吸附50-80 OD的mRNA，相当
于2000-3000 μ g mRNA。
4. mRNA提取过程操作简单，只需要离心就可以完成，免去了常规的灌柱、洗柱
等繁琐操作，样品也不会被稀释。
5. 得到的mRNA可以直接用于构建cDNA文库、蛋白质的体外翻译和RT-PCR。
使用及效果
*步，用血液RNA OUT 的方法提取全血总RNA，zui后用50μL洗脱，将两管收
集在一起，共得到100μL总RNA（详见柱式血液RNA OUT 的使用手册）。
第二步，从总RNA中纯化mRNA：将0.5 mL 溶液A（结合液）加入到一管装有
Oligo(dT)纤维素的离心管中，放置5分钟后离心吸弃上清后待用。将制备的总RNA
100μL加热到65℃ 5分钟后加入等体积的溶液A，转移到装有Oligo(dT)纤维素的离
心管中，颠倒混匀数次，离心后将上清转移到一个离心管中。用0.5 mL溶液A，混
匀后4℃ 200g 离心5分钟，小心弃上清。重复上步洗3-5次，用RNase-free水洗脱
mRNA。
第三步，如果需要浓缩，可用微量核酸沉淀剂沉淀mRNA（详见微量核酸沉淀
剂使用手册）。
注：所得mRNA只占总RNA的5%左右，很微量很珍贵，一般不宜电泳检测。100307-10    酸洗玻璃珠系列    10g    190    2-106
100405-100    SSC 溶液 ,20×    100mL    120    4-14
100406-10    溶菌酶干粉    10g    195    10-105
100408-100    DNA 级盐酸胍溶液，8M    100mL    90    2-109
100409-5    6nt 随机引物，0.5μg/μL    5μg    90    5-30
100410-1    超快转染试剂盒    1mL    1997    8-23
100502-20    高效 E.coli 感受态细胞制备试剂盒    20 次    390    6-23
100538-10    钙蛋白酶抑制剂Ⅱ溶液，10mg/mL    10mL    90    7-61
100539-1    胰凝乳蛋白酶抑制剂溶液，20mg/mL    1mL    490    7-61
100601-50    细胞核微量制备试剂盒    50 次    590    8-19
100602-250    干粉型 LB 培养基    250g    390    6-40
100603-30    银染清除剂    30 次    990    7-91
100604-1    鲑鱼精 DNA 溶液    1mL    190    4-16
100802-100    重蒸酚    100mL    50    1-64
100803-100    酸酚    100mL    120    1-65