一站式植物mRNA OUT

一站式植物mRNA OUT产品及特点
构建cDNA文库、蛋白质的体外翻译和RT-PCR方法检测稀有的mRNA等研究常
常需要从总RNA中分离mRNA，mRNA只占总RNA的1%左右，但由于带poly(A)尾
巴，所以可以通过与Oligo(dT)纤维素的亲和结合而与其他RNA（如rRNA、tRNA
等）分离开。本产品专门用于从植物组织中一站式提取mRNA，其操作如下：
一站式植物mRNA OUT它具有下列特点：
1. 一站式，是由天恩泽的高效、无多糖柱式植物RNA提取试剂和mRNA提取试剂
两个产品整合而成，即开即用，非常方便。
2. 一次可以处理50-500 mg的植物组织，能得到约10-15 μ g总RNA，从中可得
0.1-0.5 μg左右的mRNA。
3. Oligo(dT)纤维素吸附能力强，每克可以吸附50-80 OD的mRNA，相当于
2000-3000 μg mRNA。
4. mRNA提取过程操作简单，只需要离心就可以完成，免去了常规的灌柱、洗柱
等繁琐操作。
5. 得到的mRNA可以直接用于构建cDNA文库、蛋白质的体外翻译和RT-PCR。
使用及效果
1. 用植物RNA OUT 的方法提取植物总RNA，zui后用50 μ L洗脱，将两管收集在
一起，共得到100 μ L总RNA（详见柱式植物RNA OUT 的使用手册）。
2. 从总RNA中纯化mRNA：将0.5 mL 溶液A（结合液）加入到一管装有
Oligo(dT)纤维素的离心管中，放置5分钟后离心吸弃上清后待用。将制备的总RNA
100 μ L加热到65℃ 5分钟后加入等体积的溶液A，转移到装有Oligo(dT)纤维素的离
心管中，颠倒混匀数次，离心后将上清转移到一个离心管中。用0.5 mL溶液A，混
匀后4℃ 200 g 离心5分钟，小心弃上清。重复上步洗3-5次。用RNase-free水洗脱
mRNA。
3. 用微量核酸沉淀剂沉淀mRNA（详见微量核酸沉淀剂使用手册）。
注：所得mRNA只占总RNA的5%左右，很微量很珍贵，一般不宜电泳检测。100805A-100    酚 -  - 异戊醇混合液 (RNA 提取 )    100mL    90    1-65
100805B-100    酚 -  - 异戊醇混合液 (DNA 提取 )    100mL    90    1-65
100806-100    Earle 溶液    100mL    120    8-3
100807-100    杜氏 PBS 缓冲液 ,10×    100mL    90    8-4
100808-1    溴化乙锭干粉 (EB)    1g    157    3-16
100809-100    SSPE 溶液 ,20×    100mL    120    4-14
100810-1000    超快蛋白银染试剂盒    1000mL    790    7-89
100811-10    质谱兼容型蛋白银染试剂盒    10 次    890    7-90
100812-100    BLOTTO 溶液    100mL    390    4-15
100813-250    干粉型 SOB 培养基    250g    390    6-41
100814-5    Oligo dT12-18 引物，0.5μg/μL    5μg    90    5-30
100815-1.5    溶菌酶溶液，10mg/mL    1.5mL    90    10-105
100816-250    碱性胶电泳液 ,10×    250mL    90    3-7
100819-1    MDS 42T7lac 菌种    1mL    990    6-29j
100820-250    干粉型 LB-Lennox 培养基    250g    390    6-40