cDNA*链合成试剂盒

cDNA*链合成试剂盒产品及特点
本试剂盒提供合成cDNA*链所需要的全部试剂。其原理是用莫洛尼氏鼠白血
病病毒反转录酶（M-MLV RT）高效合成mRNA的全长cDNA拷贝。在基因特异性
引物存在条件下，此单链cDNA产物可直接用来进行PCR扩增，或进行其它下游操
作，cDNA*链合成试剂盒包括合成cDNA第二条链、构建cDNA文库、核酸杂交等。基于Oligo(dT)引物
的cDNA合成原理如下：
1. 使用突变的反转录酶，内源RNase H活性低。
2. zui长可合成13 Kb的cDNA。
3. 可以使用oligo-dT、随机引物和RNA专一性引物三种引物（前两种本试剂盒提
供）。
4. 总RNA、poly(A)+RNA或特殊RNA均可作为模板。
5. 可用于cDNA文库构建、RT-PCR、探针标记等。
使用及效果
在无菌管中加入1-10 μ L（1 ng-2 μ g）总RNA ，1 μ L引物，加无核酸酶污染
水补至13 μ L，70℃加热5分钟后立即冰浴，再加入5 uL RT Buffer（含dNTP），
37℃保温5分钟。继续向反应液中加入2 μ L M-MLV反转录酶（含RI），反应终体
积 为20 μ L。42℃温育1小时。70℃ 保温10分钟以终止反应，然后放置在冰上待
用。反应产物即为cDNA。17-0130    NcoI    200U    190    10-77
17-013-96    10 μL RNase-free 白吸头 ( 盒装已灭菌带芯长尖 )    96 支    110    1-68
17-014-1000    200 μL RNase-free 黄吸头 ( 袋装 )    1000 支    180    1-68
17-0150    NdeI    400U    190    10-77
17-015-1000    200 μL RNase-free 黄吸头 ( 袋装带芯 )    1000 支    750    1-68
17-0160    NotI    150U    190    10-77
17-016-96    200 μL RNase-free 黄吸头 ( 盒装 )    96 支    45    1-68
17-017-1000    200 μL RNase-free 黄吸头 ( 盒装已灭菌 )    1000 支    59    1-68
17-0180    PstI    1000U    90    10-77
17-018-96    200μLRNase-free 黄吸头 ( 盒装已灭菌带芯 )    96 支    110    1-68
17-0190    PvuII    1000U    190    10-77
17-019-1000    1000 μL RNase-free 蓝吸头 ( 袋装 )    1000 支    180    1-68
17-0200    RsaI    200U    190    10-77
17-020-1000    1000 μL RNase-free 蓝吸头 ( 袋装带芯 )    1000 支    830    1-68
17-0210    SacI    500U    190    10-77
17-021-100    1000 μL RNase-free 蓝吸头 ( 盒装 )    100 支    59    1-68
17-0220    SalI    1000U    190    10-77