克必隆常态转化液

克必隆常态转化液产品及特点
克必隆常态转化液是天恩泽推出的具有自主知识产权的革命性产品，它能
使各种常态的 E.coli 细胞直接用于快速转化实验，使广大用户不再因为简单的转化
实验而再为感受态细胞的制备，保存和运输等繁琐的事情而操心，大大地缩短了基
因克隆实验的时间，提高使用者的工作效率。
1. 不需专门制备感受态细胞，直接使用常态的细胞进行质粒转化，随用随配，十
分方便。常态细胞包括新鲜培养的菌液，新鲜的或4℃放置数月的培养基菌落，
甘油菌种保存液等。
2. 适用菌种和质粒广泛，用过的 E.coli 菌种包括K12系的DH5a和Tg1，B系的
BL21（DE3）。用过的质粒有pGEM，pET和克必隆系列等。
3. 转化效率适中，使用10 ng质粒转化一般能得到上万个转化子）效率在10 5 到
10 6 CFU/ μ g质粒之间），使用3-5  μ L连接液转化一般能得几千个转化子，足
够筛选重组子使用（但不适合构建文库）。
4. 单管快速操作，整个操作可以在一个1.5 mL塑料离心管中进行，zui短可以在
三十分钟内完成，不需要过夜细菌培养，热休克处理甚至恒温摇床，极其适用
于自动化的大规模克隆筛选工作。
5. 稳定性好，本可以在-20℃条件下长期保存而不用担心转化效率的降低，而感受
态细胞在同样条件下会迅速失去活性。
使用及效果
将数个 E.coli 菌落（或50 μ L甘油菌种液，100 μ L新鲜培养液）转入装有1 mL
液体培养基的1.5 mL塑料离心管中，37℃水浴1小时，室温10000 g离心1分钟后
去尽上清，加入转化液和1-10 μ L连接反应液，轻柔混匀，-20℃放置致凝，冰浴5
分钟，加入1 mL 液体培养基，37℃水浴1小时，取0.1-0.3 mL涂于含相关抗菌素
的固体培养基上，37℃过夜培养后即得转化菌落。120506-200    T4 聚核苷酸激酶    200U    197    10-48
120507-25    Xa 因子蛋白酶    25μg    490    10-100
120507-50    Xa 因子蛋白酶    50μg    890    10-100
120508-0.032    肠激酶 ( 轻链 )    0.032μg    790    10-100
120508-0.063    肠激酶 ( 轻链 )    0.063μg    1490    10-100
120509-20    Poly(A) 聚合酶    20U    690    10-30
120510-200    ATP 依赖的 DNase    200U    590    10-68
120511-100    CpG 甲基转移酶 (M.SssI)    100U    860    10-46
120512-20    即用型蓝白 T 载体 B 型 (T7-T3, 有 MCS)    20 次    290    6-10
120513-20    即用型蓝白 T 载体 C 型 (T7-T3，无 MCS)    20 次    290    6-11
120514-20    即用型蓝白 T 载体 D 型 ( 无启动子，有 MCS)    20 次    290    6-12
120515-20    即用型蓝白 T 载体 E 型 ( 无启动子，无 MCS)    20 次    290    6-13
120516-200    自诱导液体培养基 (arab 启动子 )    200mL    390    6-42
120517-100    大肠杆菌零诱导培养基    100mL    390    6-45
120520-10    OrigamiB(DE3) 感受态细胞    10×100μL    397    6-28c