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蜡样芽胞杆菌PCR试剂盒

型    号:50次
所属分类:PCR-染料法
报    价: 市场价:
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蜡样芽胞杆菌PCR试剂盒是群中等小的双股 DNA 病毒,根据其理化性质分 α、β、γ、未分类疱疹病毒四个亚科。疱疹病毒感染的宿主范围广泛,可感染人类和其他脊椎动物。在自然界广泛存在,主要侵犯外胚层发育而成的组织,例如:皮肤、粘膜和神经组织。

蜡样芽胞杆菌PCR试剂盒产品概述:

蜡样芽胞杆菌PCR试剂盒

Bacillus cereus

产品及特点

蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus),又称仙人掌杆菌,是一种革兰氏阳性 菌,β溶血性的杆状细菌。蜡样芽孢杆菌是兼性厌氧性。经常在土壤和食物中被 发现,有些菌株会引起食物中毒,例如"炒饭综合症";另外一些菌株则对其他 动物有益,可产生抗菌物质,抑制有害微生物的繁殖,降解土壤中的营养成分, 改善生态环境。可产生细菌蛋白酶;可用于麻脱胶,是各种抗生素抗菌活性的 测定菌。可用于明胶液化,牛奶胨化,还原硝酸盐,水解淀粉。因此快速灵敏 检测蜡样芽胞杆菌具有重要意义。本产品就是为此目的根据 PCR 原理开发的试 剂盒,它具有下列特点:

1. 即开即用,用户只需要提供 DNA 模板。

2. 引物经过精心优化,专一性强,只扩增蜡样芽胞杆菌,与其他微生物没有 交叉反应。

3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。

4. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。

5. 本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次,但只能用于科研。

蜡样芽胞杆菌PCR试剂盒规格及成分

编号

成分

规格

试剂一

PCR MagicMix 3.0

1 mL(红盖)  

试剂二

超纯水

1 mL(亮黄色)

试剂三

 蜡样芽胞杆菌PCR 引物混合液

100 μL白盖) 

试剂四

蜡样芽胞杆菌 PCR 阳性对照(1 ×10E8 拷贝/μL)

50 μL(黄盖)

 

试剂 天净沙核酸释放剂(试用装) 20 次(1 mL,绿 盖)

试剂

使用手册

1 份

运输及保存 低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。阳性对照需要单独放置,不要污染其 他试剂。  

自备试剂 样品 DNA。

使用方法 一、样品 DNA 的制备

1. 用自选方法纯化 N+2 个样品的 DNA,本试剂盒跟市场上大多数核酸提取 试剂盒兼容。

2. 如果有 N 个样品,则需要做 N+2 个提取,包括一个样品制备阳性对照和一 个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水(取决于试剂盒要求 的样品起始量)中加 10μL 蜡状芽孢杆菌 PCR 阳性对照的 10000 倍稀释 液而得,样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后后得到模板 DNA 放 冰上待用。

二、设置 PCR 反应(40μL 体系)

3. 对 N+2 个样品,在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性 对照,故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分: 

成分

样品管 N+2 个

PCR 阴性 对照管

PCR 阳性 对照 

PCR Magic Mix 3.0 

20 μL

20 μL

20 μLL

蜡样芽胞杆菌PCR引物混合液

2 μL

2 μL

2 μL

 N+2 个样品 DNA 模板各 18 μL   

PCR 阴性对照(水)

 

  18 μL

 

PCR 阳性对照(蜡样芽胞杆菌 PCR 阳性对照的 10000 倍稀释液)

    18 μL

4. 按下表设置 PCR 反应:

过程

温度

时间

预变性

95℃

5 min

PCR反应

(35个循环)

95℃

30 sec

57℃

15 sec

 72℃

40 sec

后延伸

72

10 min

 

三、电泳检测

5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在 扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳 性对照必须有 551bp 大小的条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实 验无效。对没有扩增产物的样品,可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。

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