百日咳波氏杆菌PCR试剂盒是群中等小的双股 DNA 病毒，根据其理化性质分 α、β、γ、未分类疱疹病毒四个亚科。疱疹病毒感染的宿主范围广泛，可感染人类和其他脊椎动物。在自然界广泛存在，主要侵犯外胚层发育而成的组织，例如：皮肤、粘膜和神经组织。
产品型号：50次厂商性质：生产厂家更新时间：2020-07-24访 问 量：302
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| 品牌 | 其他品牌 | 货号 | XY-0128 |
|---|---|---|---|
| 规格 | 50T | 供货周期 | 一周 |
| 主要用途 | 荧光定量PCR具有更高的扩增效率、更高的扩增灵敏度、更高的扩增特异性。 | 应用领域 | 医疗卫生,环保,化工,生物产业,农业 |
百日咳波氏杆菌PCR试剂盒
Bordetella pertussis
产品及特点
百日咳是一种由百日咳波氏杆菌引起的急性呼吸道传染病。百日咳波氏杆 菌是革兰阴性杆菌，可产生一些致病物质，包括百日咳毒素、气管细胞毒素、 腺苷酸环化酶毒素、不耐热毒素以及内毒素等。百日咳毒素可使患者淋巴组织 中的淋巴细胞动员到周围血液及气管，细胞毒素可特异性损伤气管纤毛上皮细 胞，使之变性、坏死。百日咳的临床特征为咳嗽逐渐加重，呈典型的阵发性、 痉挛性咳嗽，咳嗽终末出现深长的鸡啼样吸气性吼声，病程长达 2-3 个月，故 有百日咳之称。本产品是根据 PCR 原理开发检测百日咳波氏杆菌的试剂盒，它 具有下列特点：
1. 即开即用，用户只需要提供 DNA 模板。
2. 引物经过精心优化，专一性强，只扩增百日咳波氏杆菌，与其他病原没有 交叉反应。
3. 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。
4. PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。
5. 本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次，但只能用于科研。
百日咳波氏杆菌PCR试剂盒规格及成分
编号 | 成分 | 规格 |
试剂一 | PCR MagicMix 3.0 | 1 mL（红盖） |
试剂二 | 超纯水 | 1 mL（亮黄色） |
试剂三 | 百日咳波氏杆菌 PCR 引物混合液 | 100 μL（白盖） |
试剂四 | 百日咳波氏杆菌 PCR 阳性对照 （1×10E8 拷贝/μL） | 50 μL（黄盖））
|
试剂五 | 使用手册 | 1 份 |
运输及保存 低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。阳性对照需要单独放置，不要污染其 他试剂。
自备试剂 样品 DNA。
使用方法 一、样品 DNA 的制备
1. 用自选方法纯化 N+2 个样品的 DNA，本试剂盒跟市场上大多数核酸提取 试剂盒兼容。
2. 如果有 N 个样品，则需要做 N+2 个提取，包括一个样品制备阳性对照和一 个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水（取决于试剂盒要求 的样品起始量）中加 10μL 芽孢杆菌通用 PCR 阳性对照的 10000 倍稀释 液而得，样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后后得到模板 DNA 放 冰上待用。
二、设置 PCR 反应（40μL 体系）
3. 对 N+2 个样品，在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性 对照，故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分：
成分 | 样品管 N+2 个 | PCR 阴性 对照管 | PCR 阳性 对照 |
PCR Magic Mix 3.0 | 各20 μL | 20 μL | 20 μLL |
百日咳波氏杆菌PCR引物混合液 | 各2 μL | 2 μL | 2 μL |
| N+2 个样品 DNA 模板 | 各 18 μL | ||
PCR 阴性对照（水） |
| 18 μL |
|
PCR 阳性对照（百日咳波氏杆菌 PCR 阳性对照的 10000 倍稀释液） | 18 μL |
4. 按下表设置 PCR 反应：
过程 | 温度 | 时间 |
预变性 | 95℃ | 5 min |
PCR反应 （35个循环） | 95℃ | 15 secc |
57℃ | 15 sec | |
72℃ | 40 sec | |
后延伸 | 72℃ | 10 min |
三、电泳检测
5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在 扩增结束后可以直接上样，不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳 性对照必须有 551bp 大小的条带出现，阴性对照必须无任何扩增，否则实 验无效。对没有扩增产物的样品，可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。
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