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百日咳波氏杆菌PCR试剂盒

百日咳波氏杆菌PCR试剂盒是群中等小的双股 DNA 病毒,根据其理化性质分 α、β、γ、未分类疱疹病毒四个亚科。疱疹病毒感染的宿主范围广泛,可感染人类和其他脊椎动物。在自然界广泛存在,主要侵犯外胚层发育而成的组织,例如:皮肤、粘膜和神经组织。

  • 产品型号:50次
  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2020-07-24
  • 访  问  量:360
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详细介绍
品牌其他品牌货号XY-0128
规格50T供货周期一周
主要用途荧光定量PCR具有更高的扩增效率、更高的扩增灵敏度、更高的扩增特异性。应用领域医疗卫生,环保,化工,生物产业,农业

百日咳波氏杆菌PCR试剂盒

Bordetella pertussis

产品及特点

百日咳是一种由百日咳波氏杆菌引起的急性呼吸道传染病。百日咳波氏杆 菌是革兰阴性杆菌,可产生一些致病物质,包括百日咳毒素、气管细胞毒素、 腺苷酸环化酶毒素、不耐热毒素以及内毒素等。百日咳毒素可使患者淋巴组织 中的淋巴细胞动员到周围血液及气管,细胞毒素可特异性损伤气管纤毛上皮细 胞,使之变性、坏死。百日咳的临床特征为咳嗽逐渐加重,呈典型的阵发性、 痉挛性咳嗽,咳嗽终末出现深长的鸡啼样吸气性吼声,病程长达 2-3 个月,故 有百日咳之称。本产品是根据 PCR 原理开发检测百日咳波氏杆菌的试剂盒,它 具有下列特点:

1. 即开即用,用户只需要提供 DNA 模板。

2. 引物经过精心优化,专一性强,只扩增百日咳波氏杆菌,与其他病原没有 交叉反应。

3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。

4. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。

5. 本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次,但只能用于科研。 

百日咳波氏杆菌PCR试剂盒规格及成分

编号

成分

规格

试剂一

PCR MagicMix 3.0

1 mL(红盖)  

试剂二

超纯水

1 mL(亮黄色)

试剂三

 百日咳波氏杆菌 PCR 引物混合液

100 μL白盖) 

试剂四

百日咳波氏杆菌 PCR 阳性对照 (1×10E8 拷贝/μL) 

50 μL(黄盖)

 

试剂

使用手册

1 份

运输及保存 低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。阳性对照需要单独放置,不要污染其 他试剂。  

自备试剂 样品 DNA。

使用方法 一、样品 DNA 的制备

1. 用自选方法纯化 N+2 个样品的 DNA,本试剂盒跟市场上大多数核酸提取 试剂盒兼容。

2. 如果有 N 个样品,则需要做 N+2 个提取,包括一个样品制备阳性对照和一 个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水(取决于试剂盒要求 的样品起始量)中加 10μL 芽孢杆菌通用 PCR 阳性对照的 10000 倍稀释 液而得,样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后后得到模板 DNA 放 冰上待用。 

二、设置 PCR 反应(40μL 体系)

3. 对 N+2 个样品,在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性 对照,故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分: 

成分

样品管 N+2 个

PCR 阴性 对照管

PCR 阳性 对照 

PCR Magic Mix 3.0 

20 μL

20 μL

20 μLL

百日咳波氏杆菌PCR引物混合液

2 μL

2 μL

2 μL

 N+2 个样品 DNA 模板各 18 μL   

PCR 阴性对照(水)

 

  18 μL

 

PCR 阳性对照(百日咳波氏杆菌 PCR 阳性对照的 10000 倍稀释液)

    18 μL

4. 按下表设置 PCR 反应:

过程

温度

时间

预变性

95℃

5 min

PCR反应

(35个循环)

95℃

15 secc

57℃

15 sec

 72℃

40 sec

后延伸

72

10 min

 

三、电泳检测

5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在 扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳 性对照必须有 551bp 大小的条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实 验无效。对没有扩增产物的样品,可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。

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