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犬冠状病毒RT-PCR试剂盒会引起鲍病毒病,危害的主要对象是我国 南方养殖的九孔鲍、杂色鲍,北方地区养殖的皱纹盘鲍。该病潜伏期短,发病急,传染 性强,死亡率高,造成鲍种苗及成鲍的大量死亡,4~30d 内死亡率高达 95%以上,溶 藻胶弧菌和副溶血弧菌可能会和病毒共同感染鲍并且是鲍病的共同致病因子。
联系电话:15221858802
品牌 | 其他品牌 | 货号 | XY-0171 |
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规格 | 50T | 供货周期 | 一周 |
主要用途 | 荧光定量PCR具有更高的扩增效率、更高的扩增灵敏度、更高的扩增特异性。 | 应用领域 | 医疗卫生,环保,化工,生物产业,农林牧渔 |
犬冠状病毒RT-PCR试剂盒
Canine Corona Virus(CCoV)
产品及特点
犬冠状病毒(Canine coronavirus,CCV )为单链 RNA 病毒,有 6~7 种多 肽,其中 4 种是糖肽,不含 RNA 聚合酶及神经氨酸酶。可使犬发生程度不同的胃 肠炎症状,特征有频繁呕吐、腹泻、沉郁、厌食等症状。本病一年四季均可发生, 以冬季多发,病犬是主要的传染原,犬可通过呼吸道、消化道、粪便及污染物传染。 该病一但发生,同窝犬同室犬很难控制均可造成感染。幼犬死亡率较高,对幼犬的 危害较大。近的研究发现,CCV 感染的宿主范围有不断扩大的趋势,许多野生动物 如虎、狮、大熊猫、小熊猫、水紹也可感染。所以对犬呼吸道病毒的快速准确检测 与鉴定具有重要的临床意义。本产品根据 RT-PCR 原理开发,它具有下列特点:
1.一站式,用于不需要单独准备每种成分,包括引物和对照。
2.根据牛病毒性腹泻病毒的保守基因序列设计的引物,具有良好的特异性。
3.基于染料法qRT-PCR检测,灵敏度比常规RT-PCR高10-100倍,可以达到至少1000拷贝/反应。
4.使用一管式qRT-PCR技术,RT和PCR两步在一个试管内完成,不需要中间转移样品,降低了操作误差和可能的污染。
5.本产品足够50次30μL体系的RT-PCR,只能用于科研,不能用于临床。
犬冠状病毒RT-PCR试剂盒规格及成分
编号 | 成 份 | 规格 |
试剂一 | 双酶一管式 RT-PCR Buffer,2× | 750 uL |
试剂二 | MMLV-Taq Mix | 100 uL |
试剂三 | CCV 专一性引物对 | 100 uL |
试剂四 | CCV 阳性对照(10E8 拷贝/uL) | 50 uL |
试剂五 | 超纯水 | 1 mL |
试剂六 | 使用手册 | 1 份) |
运输及保存 低温运输,-20℃保存,保存期限一年。
自备试剂 一管式病毒 RNAout 或柱式病毒 RNAout
使用方法 一、样品 RNA 的制备
用自选方法纯化可能含 CCV 样品的 RNA,也可以另购本公司的一管式病毒 RNAout 或柱式病毒 RNAout,上述两款产品跟本试剂盒兼容。
二、阳性对照
1. 为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对 照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DNA 段作为阳性对照。
2. 使用本阳性对照时,由于其浓度较高,一定要注意不要污染其他试剂和成分。 在专门的区域操作。
三、设置 RT-PCR 反应(30 uL 体系)
3. 在 PCR 管中加入下列成分:
成分 | 样品 | 阳性对照 | 阴性对照 |
双酶一管式 RT-PCR Buffer,2× | 15 uL | 15 uL | 各15 uL |
CCV 专一性引物对 引物混合物 | 2μL | 2μL | 2μL |
样品 RNA | 1-5 uL |
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CCV 阳性对照 |
| 2 uL |
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补超纯水到 | 28 uL | 28 uL | 28 uL |
MMLV-Taq Mix | 2 uL | 2 uL | 2 uL |
4. 轻柔混匀后上机,按下面参数进行 RT-PCR。
过程 | 温度 | 时间 |
逆转录 | 60℃ | 30 分钟 |
预变性 | 94℃ | 2 分钟 |
PCR 反应 (30 个循环) | 94℃ | 30 s |
49℃ | 30 s | |
72℃ | 30 s | |
延伸 | 72℃ | 5 分钟 |
5. 电泳检测 RT-PCR 产物。预期的 PCR 产物长度为 384bp。
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