伯氏立克次氏体（柯克斯体）PCR试剂盒是群中等小的双股 DNA 病毒，根据其理化性质分 α、β、γ、未分类疱疹病毒四个亚科。疱疹病毒感染的宿主范围广泛，可感染人类和其他脊椎动物。在自然界广泛存在，主要侵犯外胚层发育而成的组织，例如：皮肤、粘膜和神经组织。
产品型号：50次厂商性质：生产厂家更新时间：2020-07-29访 问 量：292
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| 品牌 | 其他品牌 | 货号 | XY-0226 |
|---|---|---|---|
| 规格 | 50T | 供货周期 | 一周 |
| 主要用途 | 荧光定量PCR具有更高的扩增效率、更高的扩增灵敏度、更高的扩增特异性。 | 应用领域 | 医疗卫生,环保,化工,生物产业,农业 |
伯氏立克次氏体(柯克斯体)PCR试剂盒
Coxiella burnetii
产品及特点
立克次氏体为革兰氏阴性菌，是一类专性寄生于真核细胞内的 G-原核生物。 是介于细菌与病毒之间，而接近于细菌的一类原核生物。一般呈球状或杆状， 是专性细胞内寄生物，主要寄生于节肢动物，有的会通过蚤、虱、蜱、螨传入 人体、如斑疹伤寒、战壕热。本产品就是根据 PCR 原理开发的检测伯氏立克次 体产品，它具有下列特点：
1. 即开即用，用户只需要提供 DNA 模板。
2. 引物经过精心优化，专一性强，只扩增伯氏立克次氏体(柯克斯体)，但跟其 他微生物无交叉反应。
3. 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。
4. PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。
5. 本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次。
6. 本产品只能用于科研。
伯氏立克次氏体(柯克斯体)PCR试剂盒规格及成分
编号 | 成分 | 规格 |
试剂一 | PCR MagicMix 3. | 1 mL（红盖） |
试剂二 | 超纯水 | 1 mL（亮黄盖） |
试剂三 | 伯氏立克次氏体(柯克斯体)PCR 引物混合液 | 100 μL（白盖） |
试剂四 | 伯氏立克次氏体(柯克斯体) PCR 阳性对照 （1×10E8 拷贝/μL） | 50 μL（黄盖））
|
试剂五 | 使用手册 | 1 份 |
运输及保存 低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。阳性对照需要单独放置，不要污染其 他试剂。
自备试剂 样品 DNA。
使用方法 一、样品 DNA 的制备
1. 用自选方法纯化 N+2 个样品的 DNA，本试剂盒跟市场上大多数核酸提取 试剂盒兼容。
2. 如果有 N 个样品，则需要做 N+2 个提取，包括一个样品制备阳性对照和一 个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水（取决于试剂盒要求 的样品起始量）中加 10μL 芽孢杆菌通用 PCR 阳性对照的 10000 倍稀释 液而得，样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后后得到模板 DNA 放 冰上待用。
二、设置 PCR 反应（40μL 体系）
3. 对 N+2 个样品，在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性 对照，故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分：
成分 | N+2个 样品管 | PCR阴性对照 | PCR阳性对照 |
PCR Magic Mix 3.0 | 各20 μL | 20 μL | 20 μL |
伯氏立克次氏体(柯克斯体) PCR引物混合液 | 各2 μL | 2 μL | 2 μL |
N+2个样品DNA模板 | 各18 μL | - | - |
PCR 阴性对照（超纯水） | - | 18 μL | - |
PCR 阴性对照（超纯水） | - | - | 18 μL |
4. 按下表设置 PCR 反应：
过程 | 温度 | 时间 |
预变性 | 95℃ | 5 min |
PCR反应 （35个循环） | 95℃ | 30 sec |
54℃ | 30 sec | |
72℃ | 30 sec | |
后延伸 | 72℃ | 10 min |
三、电泳检测
5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在 扩增结束后可以直接上样，不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳 性对照必须有 551bp 大小的条带出现，阴性对照必须无任何扩增，否则实 验无效。对没有扩增产物的样品，可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。
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