猫杯状病毒前病毒PCR试剂盒是群中等小的双股 DNA 病毒，根据其理化性质分 α、β、γ、未分类疱疹病毒四个亚科。疱疹病毒感染的宿主范围广泛，可感染人类和其他脊椎动物。在自然界广泛存在，主要侵犯外胚层发育而成的组织，例如：皮肤、粘膜和神经组织。
产品型号：50次厂商性质：生产厂家更新时间：2020-08-03访 问 量：308
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| 品牌 | 其他品牌 | 货号 | XY-0315 |
|---|---|---|---|
| 规格 | 50T | 供货周期 | 一周 |
| 主要用途 | 荧光定量PCR具有更高的扩增效率、更高的扩增灵敏度、更高的扩增特异性。 | 应用领域 | 医疗卫生,环保,化工,生物产业,农业 |
猫杯状病毒前病毒PCR试剂盒
Feline Calicivirus(FCV)
产品及特点
猫杯状病毒（Feline calicivirus, FCV）是一种无衣壳的 RNA 病毒，主要 在淋巴结内繁殖复制。主要通过飞沫传播，所谓的飞沫传播指得就是打喷嚏， 喷口水的传播方式。猫杯状病毒感染是猫病毒性呼吸道传染病，主要表现为上 呼吸道症状，即精神沉郁、浆液性和粘液性鼻漏、结膜炎、口腔炎、气管炎、 支气管炎，伴有双相热。猫杯状病毒感染是猫的多发病，发病率高，死亡率低。 因此检测猫杯状病毒具有重要意义。本产品具有下列特点： 
1. 即开即用，用户只需要提供 FCV 的 cDNA 模板（需要提前做逆转录）或 含有 FCV 前病毒 DNA 的样品。
2. 引物经过精心优化，专一性强，只扩增猫杯状病毒前病毒，与其他病毒没 有交叉反应
3. 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。
4. PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。
5. 本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次，但只能用于科研。
猫杯状病毒前病毒PCR试剂盒规格及成分
编号 | 成分 | 规格 |
试剂一 | PCR MagicMix 3. | 1 mL（亮黄盖） |
试剂二 | 超纯水 | 1 mL（蓝色） ） |
试剂三 | 猫杯状病毒前病毒 PCR 引物混合 液 | 100 μL（白盖） |
试剂四 | 猫杯状病毒前病毒 PCR 阳性对照 （1×10E8 拷贝/μL） | 50 μL（黄盖））
|
| 试剂五 | 天净沙核酸释放剂 | 20 次（1 mL，绿盖） |
试剂六 | 使用手册 | 1 份 |
运输及保存 低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。阳性对照需要单独放置，不要污染其 他试剂。
自备试剂 样品 DNA。
使用方法 一、样品 DNA 的制备
1. 如果是提取的 FCV 的 RNA，则先逆转录得到 cDNA。本试剂盒不提供相 关试剂。
2. 如果是要提取前病毒 DNA，则用自选方法纯化 N+2 个样品的 DNA，本试 剂盒跟市场上大多数病毒 DNA 提取试剂盒兼容。
3. 如果有 N 个样品，则需要做 N+2 个提取，包括一个样品制备阳性对照和 一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在 200μL 水中加 10μL 猫 杯状病毒前病毒 PCR 阳性对照的 10000 倍稀释液而得，样品制备阴性对 照是直接用 200μL 水。提取结束后后得到 200μL 模板 DNA（每个样品） 放冰上待用，溶解 DNA 沉淀的溶液不能少于 200μL，否则 PCR 抑制物很 可能会抑制 PCR。 二、设置 PCR 反应（40μL 体系）
4. 对 N+2 个样品，在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性 对照，故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分：
成分 | N+2个 样品管 | PCR阴性对照 | PCR阳性对照 |
PCR Magic Mix 3.0 | 各20 μL | 20 μL | 20 μL |
猫杯状病毒前病毒PCR引物混合液 | 各2 μL | 2 μL | 2 μL |
| N+2 个样品 DNA 模板 | 各 18 μL | ||
PCR 阴性对照（水） |
| 18 μL | - |
PCR 阳性对照（猫杯状病毒前病毒 PCR 阳性对照的 10000 倍稀释液） | - |
| 18 μL |
5. 按下表设置 PCR 反应：
过程 | 温度 | 时间 |
预变性 | 95℃ | 5 min |
PCR 反应 （30 个循环） | 95℃ | 30 sec |
55℃ | 30 sec | |
72℃ | 30 sec | |
后延伸 | 72℃ | 10 min |
三、电泳检测
6. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在 扩增结束后可以直接上样，不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳 性对照必须有 551bp 大小的条带出现，阴性对照必须无任何扩增，否则实 验无效。对没有扩增产物的样品，可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。
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