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猫杯状病毒前病毒PCR试剂盒

猫杯状病毒前病毒PCR试剂盒是群中等小的双股 DNA 病毒,根据其理化性质分 α、β、γ、未分类疱疹病毒四个亚科。疱疹病毒感染的宿主范围广泛,可感染人类和其他脊椎动物。在自然界广泛存在,主要侵犯外胚层发育而成的组织,例如:皮肤、粘膜和神经组织。

  • 产品型号:50次
  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2020-08-03
  • 访  问  量:359
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详细介绍
品牌其他品牌货号XY-0315
规格50T供货周期一周
主要用途荧光定量PCR具有更高的扩增效率、更高的扩增灵敏度、更高的扩增特异性。应用领域医疗卫生,环保,化工,生物产业,农业

猫杯状病毒前病毒PCR试剂盒

Feline Calicivirus(FCV)

产品及特点

猫杯状病毒(Feline calicivirus, FCV)是一种无衣壳的 RNA 病毒,主要 在淋巴结内繁殖复制。主要通过飞沫传播,所谓的飞沫传播指得就是打喷嚏, 喷口水的传播方式。猫杯状病毒感染是猫病毒性呼吸道传染病,主要表现为上 呼吸道症状,即精神沉郁、浆液性和粘液性鼻漏、结膜炎、口腔炎、气管炎、 支气管炎,伴有双相热。猫杯状病毒感染是猫的多发病,发病率高,死亡率低。 因此检测猫杯状病毒具有重要意义。本产品具有下列特点: 

1. 即开即用,用户只需要提供 FCV 的 cDNA 模板(需要提前做逆转录)或 含有 FCV 前病毒 DNA 的样品。

2. 引物经过精心优化,专一性强,只扩增猫杯状病毒前病毒,与其他病毒没 有交叉反应

3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。

4. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。

5. 本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次,但只能用于科研。 

猫杯状病毒前病毒PCR试剂盒规格及成分

编号

成分

规格

试剂一

PCR MagicMix 3.

1 mL(亮黄盖)  

试剂二

超纯水

1 mL(蓝色) ) 

试剂三

猫杯状病毒前病毒 PCR 引物混合 液

100 μL白盖) 

试剂四

猫杯状病毒前病毒 PCR 阳性对照 (1×10E8 拷贝/μL)

50 μL(黄盖)

 

试剂 天净沙核酸释放剂  20 次(1 mL,绿盖)

试剂

使用手册

1 份

运输及保存 低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。阳性对照需要单独放置,不要污染其 他试剂。 

自备试剂 样品 DNA。

使用方法 一、样品 DNA 的制备

1. 如果是提取的 FCV 的 RNA,则先逆转录得到 cDNA。本试剂盒不提供相 关试剂。

2. 如果是要提取前病毒 DNA,则用自选方法纯化 N+2 个样品的 DNA,本试 剂盒跟市场上大多数病毒 DNA 提取试剂盒兼容。

3. 如果有 N 个样品,则需要做 N+2 个提取,包括一个样品制备阳性对照和 一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在 200μL 水中加 10μL 猫 杯状病毒前病毒 PCR 阳性对照的 10000 倍稀释液而得,样品制备阴性对 照是直接用 200μL 水。提取结束后后得到 200μL 模板 DNA(每个样品) 放冰上待用,溶解 DNA 沉淀的溶液不能少于 200μL,否则 PCR 抑制物很 可能会抑制 PCR。 二、设置 PCR 反应(40μL 体系)

4. 对 N+2 个样品,在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性 对照,故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分:

成分

N+2

样品

PCR阴性对照

PCR阳性对照

PCR Magic Mix 3.0

各20 μL

20 μL

20 μL

猫杯状病毒前病毒PCR引物混合液

各2 μL

2 μL

2 μL

 N+2 个样品 DNA 模板 各 18 μL  

PCR 阴性对照(水) 

 

18 μL

-

PCR 阳性对照(猫杯状病毒前病毒 PCR 阳性对照的 10000 倍稀释液)

-

 

18 μL

5. 按下表设置 PCR 反应:

过程

温度

时间

预变性

95

5 min

PCR 反应 (30 个循环)

95

30 sec

55℃

30 sec

72℃

30 sec

后延伸

72

10 min

 

三、电泳检测

6. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在 扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳 性对照必须有 551bp 大小的条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实 验无效。对没有扩增产物的样品,可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。

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