猫疱疹病毒1型PCR检测试剂盒是群中等小的双股 DNA 病毒,根据其理化性质分 α、β、γ、未分类疱疹病毒四个亚科。疱疹病毒感染的宿主范围广泛,可感染人类和其他脊椎动物。在自然界广泛存在,主要侵犯外胚层发育而成的组织,例如:皮肤、粘膜和神经组织。
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品牌 | 其他品牌 | 货号 | XY-0321 |
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规格 | 50T | 供货周期 | 一周 |
主要用途 | 荧光定量PCR具有更高的扩增效率、更高的扩增灵敏度、更高的扩增特异性。 | 应用领域 | 医疗卫生,环保,化工,生物产业,农业 |
猫疱疹病毒1型PCR检测试剂盒
Feline Herpesvirus type 1 (FHV-1)
产品及特点
猫疱疹病毒 1 型(Feline Herpesvirus type 1,FHV-1)属于疱疹病 毒科中的α-疱疹病毒,是猫病毒性鼻气管炎的病原,可引起猫及其他猫科动物 的眼病及呼吸道疾病。猫疱疹病毒会在结膜及上呼道上皮细胞内和神经元细胞 内复制增殖,神经原的感染会导致终身潜伏感染。慢性潜伏感染是猫疱疹病毒 急性感染后的典型结果,井且间歇性地再活化,排放病毒于口鼻分泌物及结膜 分泌物。因此快速灵敏检测猫疱疹病毒 1 型具有重要意义。本产品就是为此目 的根据 PCR 原理开发的试剂盒,它具有下列特点:
1. 即开即用,用户只需要提供病毒 DNA 模板。
2. 引物经过精心优化,专一性强,只扩增猫疱疹病毒 1 型,与其他病毒没有 交叉反应。
3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
4. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。
5. 本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次,但只能用于科研。
猫疱疹病毒1型PCR检测试剂盒规格及成分
编号 | 成分 | 规格 |
试剂一 | 2×PCR MagicMix | 1 mL(红盖) |
试剂二 | 超纯水 | 1 mL(亮黄色) |
试剂三 | 猫疱疹病毒 1 型 PCR 引物混合物 | 100 μL(白盖) |
试剂四 | 猫疱疹病毒 1 型 PCR 阳性对照 (1×10E8 拷贝/μL) | 50 μL(黄盖) |
试剂五 | 天净沙核酸释放剂 | 20 次(1mL,绿盖)) |
试剂六 | 使用手册 | 1 份 |
运输及保存 低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。阳性对照需要单独放置,不要污染其 他试剂。
自备试剂 样品 DNA。
使用方法一、样品 DNA 的制备
1. 用自选方法纯化 N+2 个样品的 DNA,本试剂盒跟市场上大多数病毒 DNA 提取试剂盒兼容。
2. 如果有 N 个样品,则需要做 N+2 个提取,包括一个样品制备阳性对照和 一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水(取决于试剂盒要 求的样品起始量)中加 10μL 斑点叉尾鮰病毒 PCR 阳性对照的 1 万倍稀 释液而得,样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后后得到模板 DNA 放冰上待用。
二、设置 PCR 反应(40μL 体系)
3. 对 N+2 个样品,在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性 对照,故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分:
成分 | N+2 个 样品管 | PCR 阴性 对照 | PCR 阳性 对照 |
PCR MagicMix 3.0 | 各 20 μL | 20 μL | 20 μL |
猫疱疹病毒 1 型 PCR 引 物混合液 | 各2 μL | 2 μL | 各 2 μL |
N+2 个样品 DNA 模板 | 各 18 μL |
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PCR 阴性对照(水) |
| 18 μL |
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PCR 阳性对照(猫疱疹病 毒 1 型 PCR 阳性对照的 1 万倍稀释液) |
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| 18 μL |
4. 按下表设置 PCR 反应:
过程 | 温度 | 时间 |
预变性 | 95℃ | 5 min |
PCR 反应 (35 个循环) | 95℃ | 15 sec |
55℃ | 15 sec | |
72℃ | 60 sec | |
后延伸 | 72℃ | 10 min |
三、电泳检测
5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加 loading buffer。阳性对照 必须有条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实验无效。对没有扩增 产物的样品,可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染
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