土拉热弗朗西斯菌PCR试剂盒是群中等小的双股 DNA 病毒，根据其理化性质分 α、β、γ、未分类疱疹病毒四个亚科。疱疹病毒感染的宿主范围广泛，可感染人类和其他脊椎动物。在自然界广泛存在，主要侵犯外胚层发育而成的组织，例如：皮肤、粘膜和神经组织。
产品型号：50次厂商性质：生产厂家更新时间：2020-08-03访 问 量：356
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| 品牌 | 其他品牌 | 货号 | XY-0330 |
|---|---|---|---|
| 规格 | 50T | 供货周期 | 一周 |
| 主要用途 | 荧光定量PCR具有更高的扩增效率、更高的扩增灵敏度、更高的扩增特异性。 | 应用领域 | 医疗卫生,环保,化工,生物产业,农业 |
土拉热弗朗西斯菌PCR试剂盒
Francisella tularensis
产品及特点
土拉热弗朗西斯菌（Francisella tularensis）会引起土拉杆菌病，又称野 兔热，是一种自然疫源性疾病，主要感染野生啮齿动物并可传染给其他动物和 人类。感染后的主要表现为体温升高，肝、脾、肾肿大，充血和多发性粟粒坏 死，淋巴结肿大，并有针尖大干酪样坏死灶，该疾病的传播会给养殖业带来较 大的经济损失，因此快速检测具有重要意义。本试剂盒根据 PCR 原理开发，它 具有下列特点：
1. 即开即用，用户只需要提供病毒 DNA 模板。
2. 引物经过精心优化，专一性强，只扩增土拉热弗朗西斯菌.
3. 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。
4. PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。
5. 本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次，但只能用于科研。
土拉热弗朗西斯菌PCR试剂盒规格及成分
编号 | 成分 | 规格 |
试剂一 | 2×PCR MagicMix | 1 mL（红盖） |
试剂二 | 超纯水 | 1 mL（亮黄色） |
试剂三 | 土拉热弗朗西斯菌 PCR 引物混合物 | 100 μL（白盖） |
试剂四 | 土拉热弗朗西斯菌 PCR 阳性对照 （1×10E8 拷贝/μL） | 50 μL（黄盖） |
| 试剂五 | 天净沙核酸释放剂 | 20 次（1mL，绿盖）） |
试剂六 | 使用手册 | 1 份 |
运输及保存 低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。阳性对照需要单独放置，不要污染其 他试剂。
自备试剂 样品 DNA。
使用方法一、样品 DNA 的制备
1. 用自选方法纯化 N+2 个样品的 DNA，本试剂盒跟市场上大多数病毒 DNA 提取试剂盒兼容。
2. 如果有 N 个样品，则需要做 N+2 个提取，包括一个样品制备阳性对照和 一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水（取决于试剂盒要 求的样品起始量）中加 10μL 斑点叉尾鮰病毒 PCR 阳性对照的 1 万倍稀 释液而得，样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后后得到模板 DNA 放冰上待用。
二、设置 PCR 反应（40μL 体系）
3. 对 N+2 个样品，在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性 对照，故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分：
成分 | N+2 个 样品管 | PCR 阴性 对照 | PCR 阳性 对照 |
PCR MagicMix 3.0 | 各 20 μL | 20 μL | 20 μL |
土拉热弗朗西斯菌 PCR 引 物混合液 | 各2 μL | 2 μL | 各 2 μL |
N+2 个样品 DNA 模板 | 各 18 μL |
|
|
PCR 阴性对照（水） |
| 18 μL |
|
PCR 阳性对照（土拉热弗朗西斯菌 PCR 阳性对照的 1 万倍稀释液） |
|
| 18 μL |
4. 按下表设置 PCR 反应：
过程 | 温度 | 时间 |
预变性 | 95℃ | 5 min |
PCR 反应 （35 个循环） | 95℃ | 15 sec |
| 55℃ | 15 sec | |
72℃ | 10 sec | |
| 后延伸 | 72℃ | 10 min |
三、电泳检测
5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在扩增结束后可以直接上样，不需要另外再加 loading buffer。阳性对照 必须有条带出现，阴性对照必须无任何扩增，否则实验无效。对没有扩增 产物的样品，可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染
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