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乙型肝炎病毒cccDNA PCR试剂盒

乙型肝炎病毒cccDNA PCR试剂盒是群中等小的双股 DNA 病毒,根据其理化性质分 α、β、γ、未分类疱疹病毒四个亚科。疱疹病毒感染的宿主范围广泛,可感染人类和其他脊椎动物。在自然界广泛存在,主要侵犯外胚层发育而成的组织,例如:皮肤、粘膜和神经组织。

  • 产品型号:50次
  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2020-08-03
  • 访  问  量:300
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详细介绍
品牌其他品牌货号XY-0350
规格50T供货周期一周
主要用途荧光定量PCR具有更高的扩增效率、更高的扩增灵敏度、更高的扩增特异性。应用领域医疗卫生,环保,化工,生物产业,农业

乙型肝炎病毒cccDNA PCR试剂盒

Echinococcus granulosus

产品及特点

乙型肝炎病毒(HBV)共价闭合环状 DNA(covalently closed circular DNA,cccDNA)是乙肝病毒前基因组 RNA 复制的原始模板,虽含量较少,每 个肝细胞内只有约 5-50 个拷贝,但对乙肝病毒的复制以及感染状态的建立具 有十分重要的意义,只有清除了 cccDNA,才能*消除乙肝患者病毒携带状 态。因此 cccDNA 的检测具有重要的临床意义。本产品是基于常规 PCR 技术 的乙肝病毒 cccDNA 快速检测试剂盒。它具有下列特点:

1. 即开即用,用户只需要提供病毒 DNA 模板。

2. 引物经过精心优化,专一性强,只扩增乙肝炎病毒 cccDNA。

3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。

4. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。

5. 本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次。

6. 本产品只能用于科研。

乙型肝炎病毒cccDNA PCR试剂盒规格及成分

编号

成分

规格

试剂一

PCR MagicMix 3.

1 mL(红盖)   

试剂二

超纯水

1 mL(亮黄盖) 

试剂三

乙型肝炎病毒 cccDNA PCR 引物混合液 

100 μL白盖) 

试剂四

乙型肝炎病毒 cccDNA PCR 阳性对照 (1×10E8 拷贝/μL) 

50 μL(黄盖)

 

试剂 天净沙核酸释放剂试用装 20 次(1mL,绿盖)

试剂

使用手册

1 份

运输及保存 低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。阳性对照需要单独放置,不要污染其 他试剂。 

自备试剂 样品 DNA。

使用方法 一、样品 DNA 的制备

1. 如果有 N 个样品,必须设置 N+2 个提取,多出的一个是 PC(样品制备阳 性对照),一个是 NC(样品制备阴性对照)。可以用 10μL 阳性对照的 1 千倍稀释液再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样,以此 作为 PC。另外用水作为 NC。

2. 用自选方法纯化样品的 DNA,本试剂盒跟市场上大多数寄生虫 DNA 提取 试剂盒兼容。 

二、设置 PCR 反应(40μL 体系)

3. 对 N+2 个样品,在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性 对照,故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分: 

成分

N+2

样品

PCR阴性对照

PCR阳性对照

PCR Magic Mix 3.0

各20 μL

20 μL

20 μL

乙肝炎病毒 cccDNAPCR引物混合液

各2 μL

2 μL

2 μL

 N+2 个样品 DNA 模板 各 18 μL  

PCR 阴性对照(超纯水)  

 

18 μL

-

PCR 阳性对照(乙肝炎病毒 cccDNA PCR 阳性对照的 100 倍稀释液)

-

 

18 μL

4. 按下表设置 PCR 反应:

过程

温度

时间

预变性

94℃

5 min

PCR反应

(35个循环)

94℃

30 sec

50℃ 

30 sec

72℃

30 sec

后延伸

72

5 min

 

三、电泳检测

5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在 扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳 性对照必须有 551bp 大小的条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实 验无效。对没有扩增产物的样品,可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。

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