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HIV-1前病毒PCR试剂盒

HIV-1前病毒PCR试剂盒是群中等小的双股 DNA 病毒,根据其理化性质分 α、β、γ、未分类疱疹病毒四个亚科。疱疹病毒感染的宿主范围广泛,可感染人类和其他脊椎动物。在自然界广泛存在,主要侵犯外胚层发育而成的组织,例如:皮肤、粘膜和神经组织。

  • 产品型号:50次
  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2020-08-03
  • 访  问  量:437
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详细介绍
品牌其他品牌货号XY-0379
规格50T供货周期一周
主要用途荧光定量PCR具有更高的扩增效率、更高的扩增灵敏度、更高的扩增特异性。应用领域医疗卫生,环保,化工,生物产业,农林牧渔

HIV-1前病毒PCR试剂盒

HIV-1 Provirus HIV-1

产品及特点

人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)患者血浆中病毒 RNA 水平一直以来是评判抗病 毒治疗效果或预测疾病进展的重要指标。但是,经抗病毒治疗后血浆 HIV-1RNA 已达 到基线水平感染者的血液、精液或淋巴结中仍可以检测到 HIV-1原病毒 DNA 的存在, 构成病毒储藏库,对清除 HIV-1病毒构成严重阻碍。所以在病毒载量已经检测不到的 情况下,HIV-1原病毒 DNA 水平可以作为除 CD4+T细胞计数和病毒载量之外的另一 标志物。本产品就是针对此需求而建立的一种检测 HIV-1原病毒 DNA 的 PCR 检测方 法,该种方法还可用于 HIV-1病毒储藏库中 HIV-1原病毒 DNA 的检测。本试剂盒具 有下列特点: 

1. 根据 HIV-1 LTR 基因设计的针对 HIV-1 原病毒的 PCR 引物,专一性强。

2. 即开即用,用户只需要提供样品模板,操作简单,定量准确快速。

3. 试剂盒有阳性对照,别于区分真假阳性。

4. 本试剂盒足够 50 次 40μL 反应体系的常规 PCR。

5. 本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。 

HIV-1前病毒PCR试剂盒规格及成分

编号

成分

规格

试剂一

2×PCR MagicMix 3.0

1 mL(红盖)  

试剂二

超纯水

1 mL(本色盖)  

试剂三

HIV-1 前病毒 PCR 引物混合液  

100 μL白盖) 

试剂四

HIV-1 前病毒 PCR 阳性对照

50 μL(黄盖)

 

试剂

天净沙DNA释放剂试用装

 

50次(试用装)

试剂

使用手册

1 份

运输及保存 低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。

自备试剂 样品 DNA。

使用方法 一、样品 DNA 的制备

1. 如果有 N 个样品,必须设置 N+2 个提取,多出的一个是 PC(样品制备阳 性对照),一个是 NC(样品制备阴性对照)。可以用 10μL 阳性对照的 1 千倍稀释液再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样,以此 作为 PC。另外用水作为 NC。

2. 用自选方法纯化样品的 DNA,本试剂盒跟市场上大多数寄生虫 DNA 提取 试剂盒兼容。 

二、设置 PCR 反应(40μL 体系)

3. 对 N+2 个样品,在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性 对照,故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分: 

成分

N+2

样品

PCR阴性对照

PCR阳性对照

PCR MagicMix 3.0

各20 μL

20 μL

20 μL

HIV-1 前病毒 PCR 引物混合液

各2 μL

2 μL

2 μL

N+2 个样品(包括 PC 和 NC) 

各18 μL

-

-

超纯水 

-

18 μL

-

PCR 阳性对照 10000 倍稀释液

-

-

18 μL

4. 按下列 PCR 参数进行 PCR 扩增:

过程

温度

时间

预变性

95℃

5 min

PCR反应

(35个循环)

94

30 秒

53℃

30 秒

72℃

45 秒 

后延伸

72

10 分钟

 

三、电泳检测

5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在 扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳 性对照必须有 551bp 大小的条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实 验无效。对没有扩增产物的样品,可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。

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