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人疱疹病毒6型PCR试剂盒

型    号:50次
所属分类:PCR-染料法
报    价: 市场价:
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人疱疹病毒6型PCR试剂盒是群中等小的双股 DNA 病毒,根据其理化性质分 α、β、γ、未分类疱疹病毒四个亚科。疱疹病毒感染的宿主范围广泛,可感染人类和其他脊椎动物。在自然界广泛存在,主要侵犯外胚层发育而成的组织,例如:皮肤、粘膜和神经组织。

人疱疹病毒6型PCR试剂盒产品概述:

人疱疹病毒6型PCR试剂盒

Human Herpesvirus-6(HHV-6)

产品及特点

人疱疹病毒 6 型(Human Herpesvirus-6,HHV-6)是从淋巴增生性疾病和艾 滋病患者淋巴细胞中培养获得的一种新病毒,可通过唾液飞沫及密切接触(如接 吻,共用餐、饮器具等)、输血。除免疫低下(如先天性免疫缺 陷、艾滋病、长期服用免疫抑制剂等)外,绝大多数人感染后终身都不会产生明 显症状;免疫低下者,如 HIV 感染者,当人体特异性免疫被削弱至一定程度时, 潜伏的病毒可被激活并产生急性感染症状,此时会出现间质性肺炎、脑炎、脑膜 炎、肝炎及多器官衰竭等症状,活化的病毒可大规模感染 T 淋巴细胞,使免疫功 能进一步削弱,该病毒对人体健康有较大影响,因此检测人疱疹病毒 6 型 DNA 具有重要意义。本产品就是根据 PCR 原理开发的、检测此病毒的试剂盒。本产品 具有下列特点: 

1. 即开即用,用户只需要提供病毒 DNA 模板。

2. 引物经过精心优化,专一性强,只扩增人疱疹病毒 6 型病毒 DNA,与其他病 毒没有交叉反应。

3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。

4. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。

5. 本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次,但只能用于科研。 

人疱疹病毒6型PCR试剂盒规格及成分

编号

成分

规格

试剂一

2×PCR MagicMix 3.0

1 mL(红盖)  

试剂二

超纯水

1 mL(本色盖)  

试剂三

人疱疹病毒 6 型 PCR 引物混合液 

100 μL白盖) 

试剂四

人疱疹病毒 6 型 PCR 阳性对照 (1×10E8 拷贝/μL) 

50 μL(黄盖)

 

试剂

使用手册

1 份

运输及保存 低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。人疱疹病毒 6 型 PCR 阳性对照需要单 独放置,不要污染其他试剂。

自备试剂 样品 DNA。

使用方法 一、样品 DNA 的制备

1. 如果有 N 个样品,必须设置 N+2 个提取,多出的一个是 PC(样品制备阳 性对照),一个是 NC(样品制备阴性对照)。可以用 10μL 阳性对照的 1 千倍稀释液再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样,以此 作为 PC。另外用水作为 NC。

2. 用自选方法纯化样品的 DNA,本试剂盒跟市场上大多数寄生虫 DNA 提取 试剂盒兼容。 

二、设置 PCR 反应(40μL 体系)

3. 对 N+2 个样品,在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性 对照,故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分: 

成分

N+2

样品

PCR阴性对照

PCR阳性对照

PCR MagicMix 3.0

各20 μL

20 μL

20 μL

人疱疹病毒6型通用 PCR 引物混合液

各2 μL

2 μL

2 μL

N+2 个样品 DNA 模板

各18 μL

-

-

PCR 阴性对照(水) 

-

18 μL

-

PCR 阳性对照 10000 倍稀释液

-

-

18 μL

4. 按下列 PCR 参数进行 PCR 扩增:

过程

温度

时间

预变性

95℃

5 min

PCR反应

(35个循环)

95℃

15 sec

55℃

15 sec

72℃

30 sec 

后延伸

72

10 min

 

三、电泳检测

5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在 扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳 性对照必须有 551bp 大小的条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实 验无效。对没有扩增产物的样品,可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。

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