伊氏李斯特菌PCR试剂盒是群中等小的双股 DNA 病毒,根据其理化性质分 α、β、γ、未分类疱疹病毒四个亚科。疱疹病毒感染的宿主范围广泛,可感染人类和其他脊椎动物。在自然界广泛存在,主要侵犯外胚层发育而成的组织,例如:皮肤、粘膜和神经组织。
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品牌 | 其他品牌 | 货号 | XY-0454 |
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规格 | 50T | 供货周期 | 一周 |
主要用途 | 荧光定量PCR具有更高的扩增效率、更高的扩增灵敏度、更高的扩增特异性。 | 应用领域 | 医疗卫生,环保,化工,生物产业,农业 |
伊氏李斯特菌PCR试剂盒
Listeria ivanovii
产品及特点
伊氏李斯特菌(Listeria ivanovii)是引起人兽共患伊氏李斯特菌病的病原菌,该菌感染宿主中枢神经系统是导致高死亡率的主要原因,较容易感染的动物是绵羊,所以该菌又被称为绵羊伊氏李斯特菌,感染该病菌会给养殖业带来较大的经济损失,因此伊氏李斯特菌的快速准确鉴定对该病的预防和检疫有着重要作用。本试剂盒根据荧光定量PCR原理开发,它具有下列特点:
1.即开即用,用户只需要提供细菌DNA模板。
2.引物经过精心优化,专一性强,只扩增伊氏李斯特菌。
3.提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
4.PCR mix中含上样染料,PCR后可以直接上样电泳。
5.本试剂盒足够做40μL体系的PCR 50次。
6.本产品只能用于科研。
伊氏李斯特菌PCR试剂盒规格及成分
编号 | 成分 | 规格 |
试剂一 | PCR MagicMix 3. | 1 mL(亮黄盖) |
试剂二 | 超纯水 | 1 mL(蓝色) |
试剂三 | 伊氏李斯特菌 PCR 引 物混合液 | 100 μL(白盖) |
试剂四 | 伊氏李斯特菌PCR阳性对照 | 100 μL(黄盖)
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试剂五 | 天净沙DNA释放剂试用装 | 50次(试用装) |
试剂六 | 使用手册 | 1 份 |
运输及保存 低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。阳性对照需要单独放置,不要污染其他试剂。
自备试剂 样品 DNA。
使用方法 一、样品 DNA 的制备
1. 如果有 N 个样品,必须设置 N+2 个提取,多出的一个是 PC(样品制备阳 性对照),一个是 NC(样品制备阴性对照)。可以用 10μL 阳性对照的 1 千倍稀释液再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样,以此 作为 PC。另外用水作为 NC。
2. 用自选方法纯化样品的 DNA,本试剂盒跟市场上大多数寄生虫 DNA 提取 试剂盒兼容。
二、设置 PCR 反应(40μL 体系)
3. 对 N+2 个样品,在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性 对照,故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分:
成分 | N+2个 样品管 | PCR阴性对照 | PCR阳性对照 |
PCR MagicMix 3.0 | 各20 μL | 20 μL | 20 μL |
伊氏李斯特菌 PCR引物混合液 | 各2 μL | 2 μL | 2 μL |
N+2个样品DNA模板 | 各18 μL | - | - |
样品制备阴性对照 | - | 18 μL | - |
样品制备阳性对照 | - | - | 18 μL |
4. 按下表设置 PCR 反应:
过程 | 温度 | 时间 |
预变性 | 94℃ | 5 min |
PCR反应 (35个循环) | 94℃ | 20 sec |
50℃ | 20 sec | |
72℃ | 30 sec | |
后延伸 | 72℃ | 10 min |
三、电泳检测
5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在 扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳 性对照必须有 551bp 大小的条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实 验无效。对没有扩增产物的样品,可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。
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