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淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒RT-PCR试剂盒

淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒RT-PCR试剂盒是群中等小的双股 DNA 病毒,根据其理化性质分 α、β、γ、未分类疱疹病毒四个亚科。疱疹病毒感染的宿主范围广泛,可感染人类和其他脊椎动物。在自然界广泛存在,主要侵犯外胚层发育而成的组织,例如:皮肤、粘膜和神经组织。

  • 产品型号:50次
  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2020-08-07
  • 访  问  量:438
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详细介绍
品牌其他品牌货号XY-0464
规格50T供货周期一周
主要用途荧光定量PCR具有更高的扩增效率、更高的扩增灵敏度、更高的扩增特异性。应用领域医疗卫生,环保,化工,生物产业,农业

淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒RT-PCR试剂盒

Lymphocytic Choriomeningitis Virus(LCMV)

产品及特点

淋巴细胞性脉络丛脑膜炎是由淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒引起的急性传染 病。本病临床表现不一,可以是隐性感染,或流感样,以起病急、发热,头痛, 肌痛为主要表现。典型表现为淋巴细胞性脑膜炎综合征,严重者可出现脑膜脑炎。 本产品根据 PCR 原理开发,可用于科研领域快速检测淋巴细胞性脉络丛脑膜炎 病毒。它具有下列特点:

1. 一站式,用于不需要单独准备每种成分,包括引物和对照。

2. 根据淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒的保守基因序列设计的引物,具有良好的特异性。

3. 灵敏度可以达到 1000 拷贝/反应。

4. 使用一管式 RT-PCR 技术,RT 和 PCR 两步在一个试管内完成,不需要中间 转移样品,降低了操作误差和可能的污染。

5. 本产品足够 50 次 20μL 体系的 RT-PCR。

6. 本产品只能用于科研,不能用于临床。

淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒RT-PCR试剂盒规格及成分

编号

成  份

规格

试剂一

5×双酶一管式 RT-PCR Buffer

200 μL(橘黄盖)

试剂二

MMLV-Taq Mix

75 μL(红盖)

试剂三

超纯水 

1 mL(亮黄盖)

试剂四

淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒 RT-PCR 引物 混合液 

100 μL(白盖)

试剂五

淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒 RT-PCR 阳性 对照(1×10E8 拷贝/μL) 

50 μL(黄盖)

试剂六 天净沙核酸释放剂(试用装) 20 次(1mL,绿盖)
试剂七

使用手册 

1 份

运输及保存 低温运输,-20℃保存,保存期限为 12 个月。收到货后阳性对照需要跟其他成分 分开放置,因为其容易污染其他成分,造成假阳性。 

自备试剂 样品 RNA

使用方法 一、样品 RNA 的制备

1. 如果有 N 个样品,必须设置 N+2 个提取,多出的一个是 PC(样品制备阳性 对照),一个是 NC(样品制备阴性对照)。可以用 10μL 流行性出血热病毒 PCR 阳性对照的 100 倍稀释作为制备的阳性对照;用水作为制备的阴性对照。 制备所得成为样品 RNA。

2. 用自选方法纯化 N+2 个样品的 RNA,本试剂盒跟市场上大多数病毒 RNA 提 取试剂盒兼容。

二、设置 RT-PCR 反应(20μL 体系)

3. 如果有 N+2 个样品,则标记 N+4 个 PCR 管(额外增加的两个管一个是 RT-PCR 阳性对照,另一个是 RT-PCR 阴性对照)并按照下表在 PCR 管中 加入下列成分:

成分

样品

阳性对照

阴性对照

5×双酶一管式 RT-PCR Buffer

各 4 μL

4 μL

4 μL

淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒 RT-PCR 引物混合液

2μL

2μL

2μL

N+2 个制备的 RNA 样品

各12.5 μL

 

 

超纯水 

 

12.5 μL

 

淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒 RT-PCR 阳性对照 的 100 倍稀释液

 L

 

12.5 μL

 MMLV-Taq Mix 1.5 μL  1.5 μL 1.5 μL

4. 上机进行 RT-PCR,RT-PCR 反应参数为:

过程

温度

时间

逆转录 

42℃

30 min

预变性

95℃  

5 min

PCR 反应 (35 个循环)

95℃ 

30 sec

53℃ 

30 sec

72

20 sec 

 延伸  72 7 min

5. 琼脂糖电泳检测扩增效果。如果阴性对照有扩增产物或阳性对照无扩增产物, 则说明实验失败,需要分析实验失败的原因。只有在阴性对照没有扩增产物、 阳性对照有 122bp 预期的扩增产物的情况下,才有必要分析样品的实验结果, 如果有扩增产物则为阳性,如果无则为阴性。

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