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斑节对虾杆状病毒PCR试剂盒

型    号:50次
所属分类:PCR-染料法
报    价: 市场价:
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斑节对虾杆状病毒PCR试剂盒是群中等小的双股 DNA 病毒,根据其理化性质分 α、β、γ、未分类疱疹病毒四个亚科。疱疹病毒感染的宿主范围广泛,可感染人类和其他脊椎动物。在自然界广泛存在,主要侵犯外胚层发育而成的组织,例如:皮肤、粘膜和神经组织。

斑节对虾杆状病毒PCR试剂盒产品概述:

斑节对虾杆状病毒PCR试剂盒

Penaeus Monodon-type Baculovirus(MBV)

产品及特点

斑节对虾杆状病毒(Penaeus Monodon-type Baculovirus,MBV)是引 起多种对虾生病的流行性传染病,发病后常常会导致病虾食欲减少,活动呆滞, 鳃、附肢和体表常带有大量的附生生物,受感染后幼体除部分体色加深外,并 无特别的症状,多数携带病毒的虾活动仍正常。幼体群常常无明显的症状表现 而出现大量死亡,死亡率与养殖环境有关,该病毒的感染对海产养殖业往往会 造成较大的经济损失,因此快速检测斑节对虾杆状病毒具有重要意义。本试剂 盒根据荧光定量 PCR 原理开发,它具有下列特点: 

1. 即开即用,用户只需要提供病毒 DNA 模板。

2. 引物经过精心优化,专一性强,只扩增斑节对虾杆状病毒,与其他病毒没 有交叉反应。 

3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。

4. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。

5. 本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次,但只能用于科研。

斑节对虾杆状病毒PCR试剂盒规格及成分

编号

成分

规格

试剂一

PCR MagicMix 3.

1 mL(红盖)  

试剂二

超纯水

  1 mL(亮黄色))

试剂三

斑节对虾杆状病毒 PCR 引 物混合液

100 μL白盖) 

试剂四

斑节对虾杆状病毒 PCR 阳 性对照 (1×10E8 拷贝/μL)

50 μL(黄盖)

 

试剂 DNA 病毒裂解液(试用装) 15 次(9 mL) 

试剂

使用手册

1 份

运输及保存 低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。阳性对照需要单独放置,不要污染其 他试剂。 

自备试剂 样品 DNA。

使用方法 一、样品 DNA 的制备

1. 如果有 N 个样品,必须设置 N+2 个提取,多出的一个是 PC(样品制备阳 性对照),一个是 NC(样品制备阴性对照)。可以用 10μL 阳性对照的 1 千倍稀释液再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样,以此 作为 PC。另外用水作为 NC。

2. 用自选方法纯化样品的 DNA,本试剂盒跟市场上大多数寄生虫 DNA 提取 试剂盒兼容。 

二、设置 PCR 反应(40μL 体系)

3. 对 N+2 个样品,在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性 对照,故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分: 

成分

N+2

样品

PCR阴性对照

PCR阳性对照

PCR Magic Mix 3.0

各20 μL

20 μL

20 μL

斑节对虾杆状病毒PCR 引物 混合液 

各2 μL

2 μL

2 μL

 N+2 个样品 DNA 模板 各 18 μL  

PCR 阴性对照(水) 

 

18 μL

-

PCR 阳性对照(斑节对虾杆状病毒 PCR 阳性对照的 10000 倍稀释液)

-

 

18 μL

4. 按下表设置 PCR 反应:

过程

温度

时间

预变性

95℃ 

2 min

PCR反应

(35个循环)

95℃ 

30 sec

55℃

30 sec

72℃

60 sec

后延伸

72

5 min 

 

三、电泳检测

5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在 扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳 性对照必须有 551bp 大小的条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实 验无效。对没有扩增产物的样品,可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。

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