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猪圆环病毒3型PCR试剂盒

型    号:50次
所属分类:PCR-染料法
报    价: 市场价:1290
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猪圆环病毒3型PCR试剂盒是群中等小的双股 DNA 病毒,根据其理化性质分 α、β、γ、未分类疱疹病毒四个亚科。疱疹病毒感染的宿主范围广泛,可感染人类和其他脊椎动物。在自然界广泛存在,主要侵犯外胚层发育而成的组织,例如:皮肤、粘膜和神经组织。

猪圆环病毒3型PCR试剂盒产品概述:

猪圆环病毒3型PCR试剂盒

Porcine Circovirus 3 (PCV-3)

产品及特点

猪圆环病毒(porcine circovirus,PCV)在分类学上属圆环病毒科圆环病 毒属,为已知的小的动物病毒之一。病毒粒子直径 14-17nm,呈 20 面体 对称结构,无囊膜,含有共价闭合的单股环状负链 DNA,基因组大小约为 1.76kb。PCV 对外界理化因子的抵抗力相当强。PCV3 于 2016 年*在美国 报道,与母猪丘疹性皮炎、肾病综合征和流产相关。因此快速检测猪圆环病毒 3 型具有重要意义。本产品就是根据猪圆环病毒 3 型保守区设计引物而开发的 高灵敏荧光定量 PCR 产品,它具有下列特点:

1. 即开即用,用户只需要提供 DNA 模板。

2. 引物经过精心优化,专一性强,只扩增猪圆环病毒 3 型,与其他病原没有 交叉反应。

3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。

4. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。

5. 本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次,但只能用于科研。

猪圆环病毒3型PCR试剂盒规格及成分

编号

成分

规格

试剂一

PCR MagicMix 3.

1 mL(红盖)  

试剂二

超纯水

  1 mL(亮黄色))

试剂三

猪圆环病毒 3 型 PCR 引 物混合液

100 μL白盖) 

试剂四

猪圆环病毒 3 型 PCR 阳 性对照 (1×10E8 拷贝/μL)

50 μL(黄盖)

 

试剂

使用手册

1 份

运输及保存 低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。阳性对照需要单独放置,不要污染其 他试剂。 

自备试剂 样品 DNA。

使用方法 一、样品 DNA 的制备

1. 如果有 N 个样品,必须设置 N+2 个提取,多出的一个是 PC(样品制备阳 性对照),一个是 NC(样品制备阴性对照)。可以用 10μL 阳性对照的 1 千倍稀释液再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样,以此 作为 PC。另外用水作为 NC。

2. 用自选方法纯化样品的 DNA,本试剂盒跟市场上大多数寄生虫 DNA 提取 试剂盒兼容。 

二、设置 PCR 反应(40μL 体系)

3. 对 N+2 个样品,在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性 对照,故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分: 

成分

N+2

样品

PCR阴性对照

PCR阳性对照

PCR Magic Mix 3.0

各20 μL

20 μL

20 μL

猪圆环病毒 3 型PCR 引物 混合液 

各2 μL

2 μL

2 μL

 N+2 个样品 DNA 模板 各 18 μL  

PCR 阴性对照(水) 

 

18 μL

-

PCR 阳性对照(猪圆环病毒 3 型PCR 阳性对照的 10000 倍稀释液)

-

 

18 μL

4. 按下表设置 PCR 反应:

过程

温度

时间

预变性

95℃ 

5 min

PCR反应

(35个循环)

95℃ 

30 sec

58℃

30 sec

72℃

30 sec

后延伸

72

7 min

 

三、电泳检测

5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在 扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳 性对照必须有 551bp 大小的条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实 验无效。对没有扩增产物的样品,可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。

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