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沙门氏菌通用PCR试剂盒

沙门氏菌通用PCR试剂盒是群中等小的双股 DNA 病毒,根据其理化性质分 α、β、γ、未分类疱疹病毒四个亚科。疱疹病毒感染的宿主范围广泛,可感染人类和其他脊椎动物。在自然界广泛存在,主要侵犯外胚层发育而成的组织,例如:皮肤、粘膜和神经组织。

  • 产品型号:50次
  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2020-08-12
  • 访  问  量:318
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详细介绍
品牌其他品牌货号XY-0651
规格50T供货周期一周
主要用途荧光定量PCR具有更高的扩增效率、更高的扩增灵敏度、更高的扩增特异性。应用领域医疗卫生,环保,化工,生物产业,农业

沙门氏菌通用PCR试剂盒

Salmonella spp.

产品及特点

沙门氏菌属通用(Salmonella spp.)是一种常见的食源性致病菌引起沙 门氏菌病的,属肠杆菌科,革兰氏阴性肠道杆菌。按其抗原成分,可分为甲、 乙、丙、丁、戊等群。其中与人体疾病有关的主要有甲组的副伤寒甲杆菌,乙 组的副伤寒乙杆菌和鼠伤寒杆菌,丙组的副伤寒丙杆菌和猪霍乱杆菌,丁组的 伤寒杆菌和肠炎杆菌等。除伤寒杆菌、副伤寒甲杆菌和副伤寒乙杆菌引起人类 的疾病外,大多数仅能目引起家畜、鼠类和禽类等动物的疾病,但有时也可污 染人类的食物而引起食物中毒。引起的中毒病例在世界各地的食物中毒病例中 所占数量比例非常高。在我国,70-80%细菌性食物中毒事件是由沙门氏菌引 起的,沙门氏菌的检测已成为食品质量安全监控的必检卫生指标。因此快速灵 敏检测沙门氏菌具有重要的意义,本试剂盒就是为此目的根据 PCR 原理开发, 它具有下列特点: 

1. 即开即用,用户只需要提供 DNA 模板。

2. 引物经过精心优化,专一性强,只扩增沙门氏菌,包括甲到戊群的沙门氏 菌。但跟非沙门氏菌无交叉反应。 

3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。

4. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。

5. 本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次,但只能用于科研。

沙门氏菌通用PCR试剂盒规格及成分

编号

成分

规格

试剂一

PCR MagicMix 3.

1 mL(红盖)   

试剂二

超纯水

1 mL(亮黄盖) 

试剂三

沙门氏菌属通用PCR 引物混合 液

100 μL白盖) 

试剂四

沙门氏菌属通用PCR 阳性对照(1 ×10E8 拷贝/μL)

50 μL(黄盖)

 

试剂 天净沙核酸释放剂试用装 20 次(1mL,绿盖)

试剂

使用手册

1 份

运输及保存 低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。阳性对照需要单独放置,不要污染其 他试剂。 

自备试剂 样品 DNA。

使用方法 一、样品 DNA 的制备

1. 如果有 N 个样品,必须设置 N+2 个提取,多出的一个是 PC(样品制备阳 性对照),一个是 NC(样品制备阴性对照)。可以用 10μL 阳性对照的 1 千倍稀释液再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样,以此 作为 PC。另外用水作为 NC。

2. 用自选方法纯化样品的 DNA,本试剂盒跟市场上大多数寄生虫 DNA 提取 试剂盒兼容。 

二、设置 PCR 反应(40μL 体系)

3. 对 N+2 个样品,在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性 对照,故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分: 

成分

N+2

样品

PCR阴性对照

PCR阳性对照

PCR Magic Mix 3.0

各20 μL

20 μL

20 μL

沙门氏菌属通用PCR引物混合液

各2 μL

2 μL

2 μL

 N+2 个样品 DNA 模板 各 18 μL  

PCR 阴性对照(水)

 

18 μL

-

PCR 阳性对照(沙门氏菌属通用 PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液)

-

 

18 μL

4. 按下表设置 PCR 反应:

过程

温度

时间

预变性

95℃

5 min

PCR反应

(35个循环)

95℃

15 sec

58℃

15 sec

72℃

60 sec 

后延伸

72

10 min

 

三、电泳检测

5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在 扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳 性对照必须有 551bp 大小的条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实 验无效。对没有扩增产物的样品,可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。

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