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刚地弓形虫PCR试剂盒

刚地弓形虫PCR试剂盒是群中等小的双股 DNA 病毒,根据其理化性质分 α、β、γ、未分类疱疹病毒四个亚科。疱疹病毒感染的宿主范围广泛,可感染人类和其他脊椎动物。在自然界广泛存在,主要侵犯外胚层发育而成的组织,例如:皮肤、粘膜和神经组织。

  • 产品型号:50次
  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2020-08-13
  • 访  问  量:337
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详细介绍
品牌其他品牌货号XY-0712
规格50T供货周期一周
主要用途荧光定量PCR具有更高的扩增效率、更高的扩增灵敏度、更高的扩增特异性。应用领域医疗卫生,环保,化工,生物产业,农业

刚地弓形虫PCR试剂盒

Toxophasma gondii

产品及特点

刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)是一种可感染包括人在内所有温血动物 的细胞内寄生原虫,对人畜的危害很大,孕妇感染弓形虫后导致早产、流产、胎 儿发育畸形,是当今致畸胎的四大原因之一,也是免疫功能低下患者死亡的主要 原因(如 AIDS 病人等)。传统的显微镜病原体检查方法,检出率低;以抗体检 测为主的血清学诊断方法不能准确反映弓形虫现时感染情况。PCR 检测技术的发 展为解决这些问题提供了更灵敏的方法。本产品就是以 PCR 技术为基础开发的 专门检测刚地弓形虫的试剂盒,它具有下列特点: 

1. 即开即用,用户只需要提供样品 DNA。

2. 引物经过优化,灵敏性高。 3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。

4. 特异性高,引物是根据岗地弓形虫高度保守的、长为 529 bp 的重复序列设 计。

5. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。

6. 本产品足够 50 次 40uL 体系的常规 PCR。

7. 本产品只能用于科研,不能用于临床。

刚地弓形虫PCR试剂盒规格及成分

编号

成分

规格

试剂一

PCR MagicMix 3.0(含染料)

1 mL(亮黄盖)   

试剂二

刚地弓形虫 PCR 引物对

100 uL(本色盖) 

试剂三

弓形虫基因阳性对照

50 uL(白盖)  

试剂四

超纯水

1 mL(蓝盖)

 

试剂 天净沙核酸释放剂试用装 20 次(1mL,绿盖)

试剂

使用手册

1 份

运输及保存 低温运输,-20℃保存,保存期限为 12 个月。

自备试剂 样品 DNA。

使用方法 一、样品 DNA 的制备

1. 如果有 N 个样品,必须设置 N+2 个提取,多出的一个是 PC(样品制备阳 性对照),一个是 NC(样品制备阴性对照)。可以用 10μL 阳性对照的 1 千倍稀释液再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样,以此 作为 PC。另外用水作为 NC。

2. 用自选方法纯化样品的 DNA,本试剂盒跟市场上大多数寄生虫 DNA 提取 试剂盒兼容。 

二、阳性对照

3、为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体细菌做阳性对 照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DNA 段作为阳性对照。

4、用本试剂盒的阳性对照原液稀释制备阳性对照工作液时,由于阳性对照原液 浓度非常高,一定要注意不要污染本试剂盒的其他试剂和成分。

三、设置 PCR 反应(40uL 体系)

5、对 N+2 个样品,在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性对 照,故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分: 

成分

N+2

样品

PCR阴性对照

PCR阳性对照

刚地弓形虫 PCR 引物对 

各2 μL

2 μL

2 μL

 N+2 个样品 DNA 模板 各 5 uL  

超纯水

各 13 uL 

16 uL

18uL

弓形虫基因阳性对照的 10000 倍稀释液

-

 

2 uL

 PCR MagicMix 3.0  各 20 uL 20 uL 20 uL

四、PCR 反应参数 

过程

温度

时间

预变性

94℃ 

5 min

PCR反应

(35个循环)

94℃ 

50 sec

58℃

60 sec

72℃

60 sec

后延伸

72

10 min

 

五、电泳检测

6、取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在 扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加 loading buffer。预期的 PCR 产 物长度为 212bp。阳性对照必须有此条带出现,阴性对照必须无任何扩增, 否则实验无效。对没有扩增产物的样品,可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以 排除 PCR 抑制剂的感染。 

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