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LEC-1 仓鼠卵巢细胞

Lec1 (原先叫做Pro-5wgaR1 3C,ATCC)是从脯氨酸缺陷型的CHO克隆 LEC-1 仓鼠卵巢细胞,Pro-5中挑选出来的能抗麦芽凝集素的突变株。Lec1 缺乏称作GlcNAc-T1的糖基转移酶,从而N-连接碳水化合物被阻断在Man5GlcNAc2Asn中间体。对于研究N-连接糖基化改变对内源糖蛋白或病毒感染、以克隆DNA转染产生的糖蛋白的功能和区隔化的影响,这些细胞十分有用。

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  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2020-08-31
  • 访  问  量:905
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联系电话:15221858802

详细介绍
品牌其他品牌纯度99.9
货号XYH1355规格1*10 6
供货周期一周主要用途Lec1 (原先叫做Pro-5wgaR1 3C,ATCC)是从脯氨酸缺陷型的CH
应用领域医疗卫生,环保,化工,生物产业,农业

LEC-1 仓鼠卵巢细胞

细胞介绍

Lec1 (原先叫做Pro-5wgaR1 3C,ATCC)是从脯氨酸缺陷型的CHO克隆 Pro-5中挑选出来的能抗麦芽凝集素的突变株。Lec1 缺乏称作GlcNAc-T1的糖基转移酶,从而N-连接碳水化合物被阻断在Man5GlcNAc2Asn中间体。对于研究N-连接糖基化改变对内源糖蛋白或病毒感染、以克隆DNA转染产生的糖蛋白的功能和区隔化的影响,这些细胞十分有用。

细胞特性

1) 来源:仓鼠卵巢

2) 形态:上皮细胞样,松散贴壁

3) 含量:>1x106 个/mL

4) 污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性

5) 规格:T25瓶或者1mL冻存管包装

运输和保存

可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式

(1)干冰运输,收到后立即转入液氮或者-80度冰箱冻存或直接复苏;

(2)存活细胞,收到后应继续生长,传代达到细胞生长状态良好时,再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。

(3)收到细胞后请拍照,3天内如果发现污染,请及时拍照与我们联系。

细胞用途:仅供科研使用。                       

LEC-1 仓鼠卵巢细胞细胞接收后的处理:

1) 收到细胞后,请检查发货培养瓶的状况,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。

2) 在显微镜下确认细胞生长状态时,在低倍镜(4或5X物镜)下进行,能准确判断细胞的传代密度。看细胞的形态请在10X和20×物镜下,同时给刚收到的细胞拍照,(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为细胞需要售后时提供收到细胞时细胞状态的依据。

3) 观察好细胞状态后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h。

4) 贴壁细胞:在运输过程中贴壁细胞会有脱落的现象,如发现贴壁细胞有脱落或者脱落后抱团生长,可将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,然后抽出瓶中的培养基和未贴壁细胞1000rpm离心5分钟,弃去上清重悬后接种到加有按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基的原培养瓶中(或新的培养瓶中)。

5) 悬浮细胞:T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,然后抽出瓶中的培养基和细胞1000rpm离心5分钟,弃去上清重悬后接种到新的培养瓶中(加入按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基)。

6)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞。  收到细胞后次传代建议1:2传代 。

细胞培养步骤

一.培养基及培养冻存条件准备:

1) 准备MEM α(推荐iCell-0003)培养基; 优质胎牛血清,10%;双抗,1%。细胞培养过程中,贴壁不牢,松散贴壁,容易脱落。

2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。

3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。

二. 细胞处理:

1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入250px皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。

2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:

1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。

3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

注:次传代推荐传代比例为1:2,以后传代比例可根据客户需要自己决定。

细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。

下面T25瓶为例;

1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,细胞变圆脱落后,加入2ml*培养基终止消化,可使用血球计数板计数。

2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。

3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

声明:细胞产品仅供科学研究之用,严禁转售、共享、分发、出借、赠送给任何第三方

关于细胞售后服务

1、收到细胞24小时内出现细菌、真菌、霉菌污染,72小时检测支原体阳性属于产品质量问题,无条件重发;需拍照我司确认,且非客户人为因素引起。

2、细胞运输途中受很多不可控因素(强烈震荡,温度变化,时间长等)影响,达不到理想生长状态,收到后麻烦检测细胞是否漏液,漂浮并且不能恢复贴壁能力,死亡等状况,48小时内提出并反馈如上情况,本公司为维护客户利益,承诺给客户免费补寄一次,但不建议和不提供免费补寄第二次及以上;

3、享有1个月的超长售后期;

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