猪流行性腹泻病毒定量RT-PCR检测试剂盒应用进行检测具有快速、灵敏、特异、准确、安全、操作简单、应用广泛等特点及优点,主要用于对保真性要求不高的PCR扩增和荧光定量PCR检测,能够检测低至10个拷贝的目的基因,并Z终产生可高达7个数量级的动态范围结果。
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猪流行性腹泻病毒定量RT-PCR检测试剂盒应用进行检测具有快速、灵敏、特异、准确、安全、操作简单、应用广泛等特点及优点。
产品名称:猪流行性腹泻病毒定量RT-PCR检测试剂盒
规格:25T/50T
储存条件及有效期:-20℃避光保存,避免反复冻融,有效期6个月。
样本采集、存放及运输:
1、样本采集:各类型样本按照常规方法采集;
2、存放:样本在2~8℃条件下保存应不超过72h,-70℃以下可长期保存,但应避免反复冻融(zui多冻融3次);
3、运输:采用泡沫箱加冰密封进行运输。
使用方法:
注:所有试剂使用前需*解冻,混合均匀,6,000rpm离心数秒后使用。
1. 样本处理(样本处理区)
待检样本的核酸提取可采用病毒RNA提取试剂盒或自动化核酸提取仪等,具体提取方法请参照相关说明书;阳性质控品及阴性质控品无需提取,可直接使用。
2. 扩增试剂准备(PCR前准备区)
取N个(N=阴性质控品+待检样本+阳性质控品)PCR反应管,每管分别加入FMD RT-PCR反应液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根据每头份用量计算N+1份FMD RT-PCR反应液、RT-PCR酶所需总量,两者混匀离心后分装20 μl至单个PCR反应管)。
组分每头份用量FMD RT-PCR反应液19 μlRT-PCR酶。
1 .将所有PCR反应管于6,000rpm离心30s,转移至样本处理区。
2.加样(样本处理区)
3.在上述的PCR反应管中分别加入待检样本RNA提取物、阴性质控品和阳性质控品各5 μl,盖紧管盖,于6,000rpm离心10s,转移至扩增区。
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