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随机引物法DNA探针标记试剂盒本产品是基于Feinberg和Vogelstein发明的随机引物标记法而开发出来的即用型DNA探针标记试剂盒,标记过程由双链DNA热变性、随机引物与单链DNA结合、在Klenow DNA聚合酶催化下,引物的延伸合成DNA探针并掺入标记的核苷酸三步组成
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随机引物法DNA探针标记试剂盒产品及特点
本产品是基于Feinberg和Vogelstein发明的随机引物标记法而开发出来的即
用型DNA探针标记试剂盒,标记过程由双链DNA热变性、随机引物与单链DNA结
合、在Klenow DNA聚合酶催化下,随机引物法DNA探针标记试剂盒引物的延伸合成DNA探针并掺入标记的核苷酸
三步组成,可用下面的示意图表示:
本产品在上述原理的基础上本产品的特点是:
1. 使用十聚引物,复性效率比六聚引物更高。
2. 使用无外切活性的Klenow exo- DNA聚合酶,已标记DNA探针不会被酶降解。
3. 快速,zui快1小时即可完成标记反应。
4. 所得DNA探针比活性高(对同位素可以达到10 9 cpm/ μ g DNA),检测灵敏度
高。
5. 所需模板DNA量少(只需要10 ng以上即可),DNA可以是各种形状(线状和
环状)的、也可以是单链或双链的,长度在100 bp以上均可。
6. 得到的探针长度在200-400 nt之间,可以用于Southern杂交、Northern杂
交、原位杂交、菌落和斑点印迹杂交等。
7. 三种标记选择,其中90603A可用于各种同位素标记和其他任何非同位素标
记,但需自备标记底物;90603B和90603C可分别用于生物素和地高辛标记。
使用及效果
将10ng-3 μ g的DNA模板在水(终体积不超过14 μ L)中变性5分钟后放冰上,
加入2 μ L 10×标记缓冲液、1 μ L Klenow exo-酶、1 μ L 标记核苷酸(A型中不提
供),混合后37℃保温1-20小时,加入1 μ L自备的0.5M EDTA终止反应。所得标
记探针可以直接使用或者放-20℃长期保存。120312-2500 末端脱氧核苷转移酶 (TdT) 2500U 1598 10-29
120312-500 末端脱氧核苷转移酶 (TdT) 500U 398 10-29
120401-100 热启动 Taq DNA 聚合酶 100U 157 10-3
120402-1 PCR LIC 克隆套装 1μg 990 6-17
120403-300 虾碱性磷酸酶 300U 597 10-54
120404-500 碱性磷酸酶,牛小肠 500U 397 10-53
120405-25 碱性磷酸酶,大肠杆菌 25U 150 10-52
120406-15 柱式植物叶绿体 DNAout 15 次 1990 2-58
120407-5000 S1 核酸酶 5000U 190 10-74
120408-1000 绿豆核酸酶 1000U 190 10-75
120409-50 BAL31 核酸酶 50U 190 10-71
120410-750 核酸外切酶 I 750U 190 10-89
120411-50 T4 DNA 聚合酶 50U 197 10-14
120412-5000 微球菌核酸酶 5000U 390 10-76
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