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DNA磷酸化试剂盒人工合成的PCR引物、linker和adaptor的5′端一般都是-OH基团而不是-PO4基团(除非额外付费要求在人工合成时加上-PO4基团)
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DNA磷酸化试剂盒产品及特点
人工合成的PCR引物、linker和adaptor的5′端一般都是-OH基团而不是-PO4
基团(除非额外付费要求在人工合成时加上-PO4基团),而任何DNA连接酶都不能
将一个DNA分子 5′端的-OH基团和另一个DNA分子3′端的-OH基团进行连接,因
此通过人工合成的DNA段和天然DNA之间的连接效率一般都比天然DNA彼此的连
接效率低(天然DNA 4个端口均可连接,人工合成的DNA跟天然DNA有2个端口可以
连接,人工合成的DNA之间没有任何端口可以连接),尤其是在平末端连接时。本公
司开发的DNA磷酸化产品能将DNA分子5′端的-OH基团磷酸化。其操作流程如下:
DNA磷酸化试剂盒它具有下列特点:
1. 可以快速把DNA 5′端的-OH基团变成-PO4基团,使人工合成的DNA(包括
PCR产物)跟天然DNA一样有高的连接效率。
2. 既可以对单链DNA进行磷酸化处理,也可以对双链DNA段同时磷酸化处理。
3. 处理后的DNA可以直接用于连接反应、克隆等,不需要纯化。
4. 本产品足够20次DNA的磷酸化实验。
使用及效果
将PCR胶回收片段或单链DNA段与TPK缓冲液、ATP溶液(10 mM)、T4 多
核苷酸激酶(10U/uL)混合,37℃反应30分钟,70℃热处理5分钟,灭活酶。即可
直接用于后续克隆(加入量不要超过总体积的1/5)。120676-50 即用型封堵液 (NC ) 50mL 490 4-18
120677-50 即用型封堵液 (Nylon ) 50mL 490 4-18
120679-100 6nt 随机引物 ( 抗水解 ),0.5mM 100μL 490 5-30
120680-1 放线菌素 D 溶液 ,1mg/mL 1mL 490 6-46
120681-1 可溶性两性霉素 B 溶液 ,20mg/mL 1mL 290 6-46
120682-1 杆菌肽溶液 ,100mg/mL 1mL 590 6-47
120683-1 溶液 ,50mg/mL 1mL 290 6-47
120684-1 噻孢霉素溶液 ,100mg/mL 1mL 190 6-48
120685-1 先锋霉素溶液 ,100mg/mL 1mL 390 6-48
120686-0.1 细胞松弛素 B 溶液 ,20mg/mL 0.1mL 1990 6-49
120687-1 环孢霉素 A 溶液 ,10mg/mL 1mL 990 6-49
120688-1 溶液 ,100mg/mL 1mL 240 6-46
120690-10 红霉素溶液 ,100mg/mL 10mL 190 6-49
120692-2 硫酸庆大霉素溶液 ,15mg/mL 2mL 190 6-50
120693-10 C 溶液 ,5mg/mL 10mL 990 6-51
120694-10 制霉菌素溶液 ,2mg/mL 10mL 490 6-52
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