气单胞菌通用PCR试剂盒是群中等小的双股 DNA 病毒，根据其理化性质分 α、β、γ、未分类疱疹病毒四个亚科。疱疹病毒感染的宿主范围广泛，可感染人类和其他脊椎动物。在自然界广泛存在，主要侵犯外胚层发育而成的组织，例如：皮肤、粘膜和神经组织。
产品型号：50次厂商性质：生产厂家更新时间：2020-07-21访 问 量：484
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| 品牌 | 其他品牌 | 货号 | XY-0031 |
|---|---|---|---|
| 规格 | 50T | 供货周期 | 一周 |
| 主要用途 | 荧光定量PCR具有更高的扩增效率、更高的扩增灵敏度、更高的扩增特异性。 | 应用领域 | 医疗卫生,环保,化工,生物产业,农业 |
气单胞菌通用PCR试剂盒
Aeromonas spp
产品及特点
气单胞菌属（Aeromonas spp.）属于气单胞菌科，广泛分布于自然界， 可从水源、土壤以及人的粪便中分离，引起的疾病广泛存在于哺乳动物（如人、 鸟类等）和冷血动物（如鲑、鱼、蛇等）中。在人类主要引起肠内感染和肠外 感染，前者主要表现为胃肠炎，患者通常呈症状较轻的水样腹泻，症状严重， 呈血性粪便且便中有大量白细胞者（和志贺菌引起的痢疾很相似）较少见，本 菌是夏季腹泻的常见病原菌之一，主要致病物质为溶血毒素和细胞毒素；后者 包括败血症、伤口、眼、关节、腹腔内及其他感染，主要与外伤后伤口接触了 污染的水有关。因此快速灵敏检测气单胞菌具有重要的意义，本试剂盒就是为 此目的根据 PCR 原理开发，它具有下列特点：
1. 即开即用，用户只需要提供细菌 DNA 模板。
2. 引物经过精心优化，专一性强，只扩增气单胞菌 DNA，跟其他微生物无交 叉反应。
3. 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。
4. PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。
5. 本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次。
6. 本产品只能用于科研。
气单胞菌通用PCR试剂盒规格及成分
编号 | 成分 | 规格 |
试剂一 | PCR Magic Mix 3.0 | 1 mL（红盖） |
试剂二 | 超纯水 | 1 mL（亮黄盖） |
试剂三 | 气单胞菌属通用 PCR 引物混合液 | 100 μL（白盖） |
试剂四 | 气单胞菌属通用 PCR 阳性对照 （1×10E8 拷贝/μL） | 50 μL（黄盖） |
| 试剂五 | 天净沙核酸释放剂试用装 | 20 次（1mL、绿盖） |
试剂六 | 使用手册 | 1 份 |
运输及保存 低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。阳性对照需要单独放置，不要污染其 他试剂。
自备试剂 样品 DNA。
使用方法 一、样品 DNA 的制备
1. 如果有 N 个样品，必须设置 N+2 个提取，多出的一个是 PC（样品制备阳 性对照），一个是 NC（样品制备阴性对照）。可以用 10μL 阳性对照的 100 倍稀释液再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样，以此作 为 PC。另外用水作为 NC。
2. 用自选方法纯化样品的 DNA，本试剂盒跟市场上大多数细菌 DNA 提取试 剂盒兼容。也可以选购本公司的细菌 DNAout 或柱式细菌 DNAout。本试 剂盒免费赠送 20 次免 DNA 提取的天净沙核酸释放剂，本产品的裂解液可 以直接作为 PCR 模板，省略了 DNA 提取步骤。
二、设置 PCR 反应（40 μL 体系）
3. 对 N+2 个样品，在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性 对照，故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分：
成分 | 样品管 N+2 个 | PCR 阴性 对照管 | 标准曲线 样品管（2-7 管） |
PCR Magic Mix 3.0 | 各20 μL | 20 μL | 20 μL |
气单胞菌属通用 PCR 引物混合液 | 各2 μL | 2 μL | 2 μL |
| N+2 个样品 DNA 模板 | 各 18 μL | ||
样品制备阴性对照（超纯水） |
| 18 μL |
|
| 样品制备阳性对照（气单胞菌属 通用阳性对照的 100 倍稀释液） | 18 μL |
4. 按下表设置 PCR 反应
过程 | 温度 | 时间 |
预变性 | 95℃ | 5 min |
PCR 反应 （40个循环） | 95℃ | 15 sec |
| 55℃ | 15 sec | |
| 72℃ | 60 sec | |
72℃ | 10 min |
三、电泳检测
5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在扩增结束后可以直接上样，不需要另外再加 loading buffer。预期的 PCR 产物长度为 471bp。阳性对照必须有此条带出现，阴性对照必须无任何扩 增，否则实验无效。对没有扩增产物的样品，可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。
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