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灭鲑气单胞菌PCR试剂盒

灭鲑气单胞菌PCR试剂盒是群中等小的双股 DNA 病毒,根据其理化性质分 α、β、γ、未分类疱疹病毒四个亚科。疱疹病毒感染的宿主范围广泛,可感染人类和其他脊椎动物。在自然界广泛存在,主要侵犯外胚层发育而成的组织,例如:皮肤、粘膜和神经组织。

  • 产品型号:50次
  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2020-07-21
  • 访  问  量:423
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详细介绍
品牌其他品牌货号XY-0030
规格50T供货周期一周
主要用途荧光定量PCR具有更高的扩增效率、更高的扩增灵敏度、更高的扩增特异性。应用领域医疗卫生,环保,化工,生物产业,农业

灭鲑气单胞菌PCR试剂盒

Aeromonas salmonicida

产品及特点

灭鲑气单胞菌(Aeromonas salmonicida)是气单胞菌属(Aeromonas)细 菌的一个种,是引起鲑鳟鱼类疖疮病及溃疡病的主要病原菌,给鲑科 (Salmonidae)鱼类养殖带来严重损失。近年来研究表明,该菌宿主范围逐渐扩 大,可感染除了鲑科外的其他水产动物,如刺参、斑点叉尾鲙、乌鳢和大菱鲆 等。对灭鲑气单胞菌的检测主要依赖于传统的微生物分离培养鉴定方法,其操 作过程费时、繁琐,且很难得到准确结果,常常延误病情的诊断,而且对于已 感染该菌但尚未发病的鱼类,通过常规分离鉴定方法很难得到准确结果本产品 是根据 PCR 原理开发的灭鲑气单胞菌检测试剂盒,它具有下列特点:

1. 即开即用,用户只需要提供 DNA 模板。

2. 引物经过精心优化,专一性强,只扩增灭鲑气单胞菌。

3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。

4. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。

5. 本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次,但只能用于科研。

灭鲑气单胞菌PCR试剂盒规格及成分

编号

成分

规格

试剂一

PCR Magic Mix 3.0

1 mL(红盖)  

试剂二

超纯水

1 mL(亮黄色)

试剂三

灭鲑气单胞菌 PCR 引物混合液

100 μL(白盖)

试剂四

灭鲑气单胞菌 PCR 阳性对照 (1×10E8 拷贝/μL)

50 μL(盖)

试剂六

使用手册

1 份

运输及保存 低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。阳性对照需要单独放置,不要污染其 他试剂。

自备试剂 样品 DNA。

使用方法 一、样品 DNA 的制备

1. 用自选方法纯化 N+2 个样品的 DNA,本试剂盒跟市场上大多数核酸提取 试剂盒兼容。

2. 如果有 N 个样品,则需要做 N+2 个提取,包括一个样品制备阳性对照和一 个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水(取决于试剂盒要求 的样品起始量)中加 10μL 灭鲑气单胞菌 PCR 阳性对照的 10000 倍稀释 液而得,样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后后得到模板 DNA 放 冰上待用。

二、设置 PCR 反应(40μL 体系)

3. 对 N+2 个样品,在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性 对照,故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分:

成分

样品管 N+2 个

PCR 阴性 对照管

标准曲线 样品管(2-7 管)

PCR Magic Mix 3.0 

20 μL

20 μL

20 μL

灭鲑气单胞菌 PCR 引物 混合液

2 μL

2 μL

2 μL

 N+2 个样品 DNA 模板各 18 μL    

PCR 阴性对照(水)

 

 18 μL 

 

 PCR 阳性对照(灭鲑气单 胞菌 PCR 阳性对照的 10000 倍稀释液)    18 μL 

4. 按下表设置 PCR 反应

过程

温度

时间

预变性

95℃

 5 min

 

PCR 反应

40个循环

95℃ 

30 sec

 55℃30 sec
 72℃25 sec 

72℃ 

7 min

 

三、电泳检测

5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在 扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳 性对照必须有预期条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实验无效。 对没有扩增产物的样品,可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑 制剂的感染。

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