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粪肠球菌PCR试剂盒

粪肠球菌PCR试剂盒是群中等小的双股 DNA 病毒,根据其理化性质分 α、β、γ、未分类疱疹病毒四个亚科。疱疹病毒感染的宿主范围广泛,可感染人类和其他脊椎动物。在自然界广泛存在,主要侵犯外胚层发育而成的组织,例如:皮肤、粘膜和神经组织。

  • 产品型号:50次
  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2020-07-30
  • 访  问  量:377
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详细介绍
品牌其他品牌货号XY-0273
规格50T供货周期一周
主要用途荧光定量PCR具有更高的扩增效率、更高的扩增灵敏度、更高的扩增特异性。应用领域医疗卫生,环保,化工,生物产业,农业

粪肠球菌PCR试剂盒

Enterococcus faecalis

产品及特点

粪肠球菌(Enterococcus faecalis)是革兰氏阳性,过氧化氢阴性球菌, 是人和动物肠道内主要菌群之一,其能产生天然抗生素,有利于机体健康;同 时还能产生细菌素等抑菌物质,抑制大肠杆菌和沙门氏菌等病原菌的生长,改 善肠道微环境;还能抑制肠道内产尿素酶细菌和菌的繁殖,减少肠道尿素 酶和内毒素的含量,使血液中氨和内毒素的含量下降。粪肠球菌作为一种益生 菌,在医学和食品工程领域得到广泛应用。另外,肠球菌为消化道内正常存在 的一类微生物,在肠黏膜具有较强的耐受和定植能力,并且是一种兼性厌氧的 乳酸菌,与厌氧、培养保存条件苛刻的双歧杆菌相比,更适合于生产和应用。 本产品是根据 PCR 原理开发的试剂盒,它具有下列特点:

1. 即开即用,用户只需要提供 DNA 模板。

2. 引物经过精心优化,专一性强,只扩增粪肠球菌,与其他微生物没有交叉 反应。

3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。

4. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。

5. 本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次,但只能用于科研。

粪肠球菌PCR试剂盒规格及成分

编号

成分

规格

试剂一

PCR MagicMix 3.

1 mL(红盖)   

试剂二

超纯水

1 mL(亮黄盖) 

试剂三

粪肠球菌 PCR 引物混合 液

100 μL白盖) 

试剂四

粪肠球菌 PCR 阳性对照 (1×10E8 拷贝/μL)

50 μL(黄盖)

 

试剂 天净沙核酸释放剂试用装 20 次(1mL,绿盖)

试剂

使用手册

1 份

运输及保存 低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。阳性对照需要单独放置,不要污染其 他试剂。 

自备试剂 样品 DNA。

使用方法 一、样品 DNA 的制备

1. 如果有 N 个样品,必须设置 N+2 个提取,多出的一个是 PC(样品制备阳 性对照),一个是 NC(样品制备阴性对照)。可以用 10μL 阳性对照的 1 千倍稀释液再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样,以此 作为 PC。另外用水作为 NC。

2. 用自选方法纯化样品的 DNA,本试剂盒跟市场上大多数寄生虫 DNA 提取 试剂盒兼容。 

二、设置 PCR 反应(40μL 体系)

3. 对 N+2 个样品,在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性 对照,故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分: 

成分

N+2

样品

PCR阴性对照

PCR阳性对照

PCR Magic Mix 3.0

各20 μL

20 μL

20 μL

粪肠球菌PCR引物混合液

各2 μL

2 μL

2 μL

 N+2 个样品 DNA 模板 各 18 μL  

样品制备阴性对照(水) 

 

18 μL

-

PCR 阳性对照(粪肠球菌 PCR 阳性对

-

 

18 μL

4. 按下表设置 PCR 反应:

过程

温度

时间

预变性

95

5 min

PCR反应

(35个循环)

95

15 sec

57℃

15 sec

72℃

40 sec

后延伸

72

10 min

 

三、电泳检测

5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在 扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳 性对照必须有 551bp 大小的条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实 验无效。对没有扩增产物的样品,可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。

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