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口蹄疫病毒通用RT-PCR试剂盒

口蹄疫病毒通用RT-PCR试剂盒是群中等小的双股 DNA 病毒,根据其理化性质分 α、β、γ、未分类疱疹病毒四个亚科。疱疹病毒感染的宿主范围广泛,可感染人类和其他脊椎动物。在自然界广泛存在,主要侵犯外胚层发育而成的组织,例如:皮肤、粘膜和神经组织。

  • 产品型号:50次
  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2020-08-03
  • 访  问  量:352
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详细介绍
品牌其他品牌货号 XY-0326
规格50T供货周期一周
主要用途荧光定量PCR具有更高的扩增效率、更高的扩增灵敏度、更高的扩增特异性。应用领域医疗卫生,环保,化工,生物产业,农业

口蹄疫病毒通用RT-PCR试剂盒

Foot-and-Mouth Disease Virus(FMDV)

产品及特点

口蹄疫病毒(Foot-and-Mouth Disease Virus, FMDV)会引发口蹄疫,易 感染的动物是黄牛等;野生动物也易感染此病。口蹄疫在亚洲、非洲和中东以及 南美均有流行,口蹄疫发病后一般不致死,但会使病兽的口、蹄部出现大量水疱, 高烧不退,使实际畜产量锐减。另外,有个别口蹄疫病毒的变种可传染给人。因 此,每次爆发后只能屠宰和集体焚毁染病牲畜以*患。由于口蹄疫传播迅速、 难于防治、补救措施少,被称为畜牧业的“*杀手”,因此快速灵敏诊断具有 重要意义。本产品根据 PCR 原理开发,可用于科研领域快速检测口蹄疫病毒。 它具有下列特点: 

1. 一站式,用于不需要单独准备每种成分,包括引物和对照。

2. 根据口蹄疫病毒 O 亚型的保守基因序列设计的引物,具有良好的特异性。

3. 灵敏度可以达到 1000 拷贝/反应。

4. 使用一管式 RT-PCR 技术,RT 和 PCR 两步在一个试管内完成,不需要中间 转移样品,降低了操作误差和可能的污染。

5. 本产品足够 50 次 20μL 体系的 RT-PCR。

6. 本产品只能用于科研,不能用于临床。

口蹄疫病毒通用RT-PCR试剂盒规格及成分

编号

成  份

规格

试剂一

5×双酶一管式 RT-PCR Buffer

200 μL(橘黄盖)

试剂二

MMLV-Taq Mix

75 μL(红盖)

试剂三

超纯水 

1 mL(亮黄盖)

试剂四

口蹄疫病毒通用  RT-PCR 引物 混合液 

100 μL(白盖)

试剂五

口蹄疫病毒通用  RT-PCR 阳性 对照(1×10E8 拷贝/μL) 

50 μL(黄盖)

试剂六 天净沙核酸释放剂(试用装) 20 次(1mL,绿盖)
试剂七

使用手册 

1 份

运输及保存 低温运输,-20℃保存,保存期限为 12 个月。收到货后阳性对照需要跟其他成分 分开放置,因为其容易污染其他成分,造成假阳性。 

自备试剂 样品 RNA

使用方法 一、样品 RNA 的制备

1. 如果有 N 个样品,必须设置 N+2 个提取,多出的一个是 PC(样品制备阳性 对照),一个是 NC(样品制备阴性对照)。可以用 10μL 流行性出血热病毒 PCR 阳性对照的 100 倍稀释作为制备的阳性对照;用水作为制备的阴性对照。 制备所得成为样品 RNA。

2. 用自选方法纯化 N+2 个样品的 RNA,本试剂盒跟市场上大多数病毒 RNA 提 取试剂盒兼容。

二、设置 RT-PCR 反应(20μL 体系)

3. 如果有 N+2 个样品,则标记 N+4 个 PCR 管(额外增加的两个管一个是 RT-PCR 阳性对照,另一个是 RT-PCR 阴性对照)并按照下表在 PCR 管中 加入下列成分:

成分

样品

阳性对照

阴性对照

5×双酶一管式 RT-PCR Buffer

各 4 μL

4 μL

4 μL

口蹄疫病毒通用  RT-PCR 引物混合液

2μL

2μL

2μL

N+2 个制备的 RNA 样品

各12.5 μL

 

 

超纯水 

 

12.5 μL

 

口蹄疫病毒通用  RT-PCR 阳性对照 的 100 倍稀释液

 

 

12.5 μL

 MMLV-Taq Mix 1.5 μL  1.5 μL 1.5 μL

4. 上机进行 RT-PCR,RT-PCR 反应参数为:

过程

温度

时间

逆转录 

42℃

30 min

预变性

95℃  

5 min

PCR 反应 (35 个循环)

95℃ 

30 sec

55℃ 

30 sec

72

15 sec

 延伸  72 7 min

5. 琼脂糖电泳检测扩增效果。如果阴性对照有扩增产物或阳性对照无扩增产物, 则说明实验失败,需要分析实验失败的原因。只有在阴性对照没有扩增产物、 阳性对照有 122bp 预期的扩增产物的情况下,才有必要分析样品的实验结果, 如果有扩增产物则为阳性,如果无则为阴性。

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