分枝杆菌属通用PCR试剂盒是群中等小的双股 DNA 病毒,根据其理化性质分 α、β、γ、未分类疱疹病毒四个亚科。疱疹病毒感染的宿主范围广泛,可感染人类和其他脊椎动物。在自然界广泛存在,主要侵犯外胚层发育而成的组织,例如:皮肤、粘膜和神经组织。
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品牌 | 其他品牌 | 货号 | XY-0507 |
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规格 | 50T | 供货周期 | 一周 |
主要用途 | 荧光定量PCR具有更高的扩增效率、更高的扩增灵敏度、更高的扩增特异性。 | 应用领域 | 医疗卫生,环保,化工,生物产业,农业 |
分枝杆菌属通用PCR试剂盒
Mycobacterium spp.
产品及特点
分枝杆菌属(Mycobacterium spp.)是一类细长略弯曲的,有时有分枝 或出现丝状体。本属细菌的主要特点是细胞壁含有大量脂质,主要是分枝菌酸。 这和其染色性、生长特性、致病性、抵抗力等密切相关。一般不易着色,若经 加温或延长染色时间而着色后能抵抗强脱色剂盐酸乙醇的脱色,故又称抗酸杆 菌。该菌属无鞭毛、无芽胞、不产生内、外毒素,其致病性和菌体成分有关。 引起的疾病都呈慢性,并伴有肉芽肿。分枝杆菌种类较多,对人致病的主要有 结核分枝杆菌和麻风分枝杆菌。因此快速灵敏检测分枝杆菌具有重要意义。本 产品就是为此目的根据 PCR 原理开发的试剂盒,它具有下列特点:
1. 即开即用,用户只需要提供 DNA 模板。
2. 引物经过精心优化,专一性强,只扩增分枝杆菌,与其他微生物没有交叉 反应。
3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
4. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。
5. 本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次,但只能用于科研。
分枝杆菌属通用PCR试剂盒规格及成分
编号 | 成分 | 规格 |
试剂一 | PCR MagicMix 3. | 1 mL(红盖) |
试剂二 | 超纯水 | 1 mL(亮黄盖) |
试剂三 | 分枝杆菌属通用 PCR 引物混合 液 | 100 μL(白盖) |
试剂四 | 分枝杆菌属通用 PCR 阳性对照 (1×10E8 拷贝/μL) | 50 μL(黄盖))
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试剂五 | 天净沙核酸释放剂试用装 | 20 次(1mL,绿盖) |
试剂六 | 使用手册 | 1 份 |
运输及保存 低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。阳性对照需要单独放置,不要污染其 他试剂。
自备试剂 样品 DNA。
使用方法 一、样品 DNA 的制备
1. 如果有 N 个样品,必须设置 N+2 个提取,多出的一个是 PC(样品制备阳 性对照),一个是 NC(样品制备阴性对照)。可以用 10μL 阳性对照的 1 千倍稀释液再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样,以此 作为 PC。另外用水作为 NC。
2. 用自选方法纯化样品的 DNA,本试剂盒跟市场上大多数寄生虫 DNA 提取 试剂盒兼容。
二、设置 PCR 反应(40μL 体系)
3. 对 N+2 个样品,在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性 对照,故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分:
成分 | N+2个 样品管 | PCR阴性对照 | PCR阳性对照 |
PCR Magic Mix 3.0 | 各20 μL | 20 μL | 20 μL |
分枝杆菌属通用PCR引物混合液 | 各2 μL | 2 μL | 2 μL |
N+2 个样品 DNA 模板 | 各 18 μL | ||
PCR 阴性对照(水) |
| 18 μL | - |
PCR 阳性对照(分枝杆菌 属通用 PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液) | - |
| 18 μL |
4. 按下表设置 PCR 反应:
过程 | 温度 | 时间 |
预变性 | 95℃ | 5 min |
PCR反应 (35个循环) | 95℃ | 15 sec |
57℃ | 15 sec | |
72℃ | 40 sec | |
后延伸 | 72℃ | 10 min |
三、电泳检测
5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在 扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳 性对照必须有 551bp 大小的条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实 验无效。对没有扩增产物的样品,可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。
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