丝状支原体山羊亚种PCR试剂盒是群中等小的双股 DNA 病毒,根据其理化性质分 α、β、γ、未分类疱疹病毒四个亚科。疱疹病毒感染的宿主范围广泛,可感染人类和其他脊椎动物。在自然界广泛存在,主要侵犯外胚层发育而成的组织,例如:皮肤、粘膜和神经组织。
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品牌 | 其他品牌 | 货号 | XY-0520 |
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规格 | 50T | 供货周期 | 一周 |
主要用途 | 荧光定量PCR具有更高的扩增效率、更高的扩增灵敏度、更高的扩增特异性。 | 应用领域 | 医疗卫生,环保,化工,生物产业,农业 |
丝状支原体山羊亚种PCR试剂盒
Mycoplasma mycoidessubsp(capri)
产品及特点
羊传染性胸膜肺炎又称羊支原体性肺炎,是由支原体所引起的一种高度接 触性传染病,其临床特征为高热,咳嗽,胸和胸膜发生浆液性和纤维素性炎症, 取急性和慢性经过,病死率很高。引起山羊传染性胸膜肺炎的病原体为丝状支 原体山羊亚种,为细小、多变性的微生物,革兰氏染色阴性。在自然条件下, 丝状支原体山羊亚种只感染山羊,3 岁以下的山羊易感染,而绵羊肺炎支原 体则可感染山羊和绵羊。本病常呈地方流行性,接触传染性很强,主要通过空 气-飞沫经呼吸道传染。阴雨连绵,寒冷潮湿,羊群密集、拥挤等因素,有利于 空气-飞沫传染的发生;多发生在山区和草原,主要见于冬季和早春枯草季节, 羊只营养缺乏,容易受寒感冒,因而机体抵抗力降低,较易发病,发病后病死 率也较高。本产品是根据 PCR 原理开发检测丝状支原体山羊亚种的试剂盒,它 具有下列特点:
1. 即开即用,用户只需要提供 DNA 模板。
2. 引物经过精心优化,专一性强,只扩增丝状支原体山羊亚种,与其他微生 物没有交叉反应。
3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
4. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。
5. 本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次,但只能用于科研。
丝状支原体山羊亚种PCR试剂盒规格及成分
编号 | 成分 | 规格 |
试剂一 | PCR MagicMix 3. | 1 mL(红盖) |
试剂二 | 超纯水 | 1 mL(亮黄色)) |
试剂三 | 丝状支原体山羊亚种 引 物混合液 | 100 μL(白盖) |
试剂四 | 丝状支原体山羊亚种 PCR 阳 性对照 (1×10E8 拷贝/μL) | 50 μL(黄盖))
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试剂五 | 使用手册 | 1 份 |
运输及保存 低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。阳性对照需要单独放置,不要污染其 他试剂。
自备试剂 样品 DNA。
使用方法 一、样品 DNA 的制备
1. 如果有 N 个样品,必须设置 N+2 个提取,多出的一个是 PC(样品制备阳 性对照),一个是 NC(样品制备阴性对照)。可以用 10μL 阳性对照的 1 千倍稀释液再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样,以此 作为 PC。另外用水作为 NC。
2. 用自选方法纯化样品的 DNA,本试剂盒跟市场上大多数寄生虫 DNA 提取 试剂盒兼容。
二、设置 PCR 反应(40μL 体系)
3. 对 N+2 个样品,在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性 对照,故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分:
成分 | N+2个 样品管 | PCR阴性对照 | PCR阳性对照 |
PCR Magic Mix 3.0 | 各20 μL | 20 μL | 20 μL |
丝状支原体山羊亚种 引物 混合液 | 各2 μL | 2 μL | 2 μL |
N+2 个样品 DNA 模板 | 各 18 μL | ||
PCR 阴性对照(水) |
| 18 μL | - |
PCR 阳性对照(丝状支原体山羊亚种 PCR 阳性对照的 10000 倍稀释液) | - |
| 18 μL |
4. 按下表设置 PCR 反应:
过程 | 温度 | 时间 |
预变性 | 95℃ | 5 min |
PCR反应 (35个循环) | 95℃ | 15 sec |
57℃ | 15 sec | |
72℃ | 40 sec | |
后延伸 | 72℃ | 7 min |
三、电泳检测
5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在 扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳 性对照必须有 551bp 大小的条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实 验无效。对没有扩增产物的样品,可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。
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