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肺炎支原体PCR试剂盒

肺炎支原体PCR试剂盒是群中等小的双股 DNA 病毒,根据其理化性质分 α、β、γ、未分类疱疹病毒四个亚科。疱疹病毒感染的宿主范围广泛,可感染人类和其他脊椎动物。在自然界广泛存在,主要侵犯外胚层发育而成的组织,例如:皮肤、粘膜和神经组织。

  • 产品型号:50次
  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2020-08-10
  • 访  问  量:341
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详细介绍
品牌其他品牌货号XY-0521
规格50T供货周期一周
主要用途荧光定量PCR具有更高的扩增效率、更高的扩增灵敏度、更高的扩增特异性。应用领域医疗卫生,环保,化工,生物产业,农业

肺炎支原体PCR试剂盒

Mycoplasma pneumoniae

产品及特点

肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae )是人类支原体肺炎的病原体。 支原体肺炎的病理改变以间质性肺炎为主,有时并发支气管肺炎,称为原发性 非典型性肺炎。主要经飞沫传染,潜伏期 2-3 周,发病率以青少年。临床 症状较轻,甚至根本无症状,若有也只是头痛、咽痛、发热、咳嗽等一般的呼 吸道症状,但也有个别死亡报道。一年四季均可发生,但多在秋冬时节。本试 剂盒是根据 PCR 原理开发,具有下列特点:

1. 即开即用,用户只需准备样品 DNA 模板。

2. 根据肺炎支原体保守区设计引物。

3. 特异性高,跟其他微生物无交叉反应。

4. 灵敏高,可检测低至几个拷贝/反应的支原体污染。

5. 提供内参和无感染性的支原体阳性对照(DNA 段),能有效避免实验结 果的假阳性和假阴性。

6. 可用于培养细胞、疫苗、血清、重组蛋白和耗材的污染检测。但不能用于 临床诊断。

7. 本产品足够至少 50 次 40μL 体系 PCR 检测(含阳性对照和阴性对照反应)。

肺炎支原体PCR试剂盒规格及成分

编号

成分

规格

试剂一

PCR MagicMix 3.

1 mL(红盖)  

试剂二

超纯水

  1 mL(亮黄色))

试剂三

肺炎支原体 PCR 引 物混合液

100 μL白盖) 

试剂四

肺炎支原体 PCR 阳 性对照 (1×10E8 拷贝/μL)

50 μL(黄盖)

 

试剂

使用手册

1 份

运输及保存 低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。阳性对照需要单独放置,不要污染其 他试剂。 

自备试剂 样品 DNA。

使用方法 一、样品 DNA 的制备

1. 如果有 N 个样品,必须设置 N+2 个提取,多出的一个是 PC(样品制备阳 性对照),一个是 NC(样品制备阴性对照)。可以用 10μL 阳性对照的 1 千倍稀释液再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样,以此 作为 PC。另外用水作为 NC。

2. 用自选方法纯化样品的 DNA,本试剂盒跟市场上大多数寄生虫 DNA 提取 试剂盒兼容。 

二、设置 PCR 反应(40μL 体系)

3. 对 N+2 个样品,在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性 对照,故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分: 

成分

N+2

样品

PCR阴性对照

PCR阳性对照

PCR Magic Mix 3.0

各20 μL

20 μL

20 μL

肺炎支原体 引物 混合液 

各2 μL

2 μL

2 μL

 N+2 个样品 DNA 模板 各 18 μL  

PCR 阴性对照(水) 

 

18 μL

-

PCR 阳性对照(肺炎支原体 PCR 阳性对照的 10000 倍稀释液)

-

 

18 μL

4. 按下表设置 PCR 反应:

过程

温度

时间

预变性

95℃ 

5 min

PCR反应

(35个循环)

95℃ 

30 sec

57℃

30 sec

72℃

20 sec

后延伸

72

7 min

 

三、电泳检测

5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在 扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳 性对照必须有 551bp 大小的条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实 验无效。对没有扩增产物的样品,可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。

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