MCF-7-DDP细胞

MCF-7-DDP细胞

一、       基本特性

细胞名称：MCF-7-DDP

描述：采用顺铂逐渐增加剂量和间歇大剂量冲击相结合的方法诱导MCF-7细胞对顺铂的耐药性，细胞对顺铂的zui大耐受性达5 μg/mL。

细胞形态：上皮样

组织来源：胸水

细胞活力：95％（Viability by Trypan Blue Exclusion）

细胞检测：细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌

培养条件：RPMI-1640(Gibco,31800-022)，90%；胎牛血清，10%。 气相：空气，95%；二氧化碳，5%； 温度：37℃。

二、       使用方法

客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作。

1.    收到细胞，请查看瓶子是否有破裂，培养基是否漏出，是否浑浊，如有请尽快和我们。

2.    如包装完好，取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒,拆下封口膜,在显微镜下观察细胞形态是否正常，细胞的贴壁情况以及细胞密度,然后放入37℃，5%CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者，以稳定细胞状态。

3.    细胞状态稳定后，弃除培养瓶中大部分液体，只剩5-10ml左右培养液继续培养就可以了，超过80%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。

如为悬浮细胞，吸出培养液，1000转/分钟离心3-5min,吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。

4.    细胞传代

1)    吸出25cm2培养瓶中的培养基,用PBS 2-3ml清洗细胞一次；

2)    添加0.25%胰蛋白酶消化液约1.5ml至培养瓶中，37℃温浴1-2min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入*培养液终止消化；

3)    用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的*培养基至5ml，放入37℃，5%CO2细胞培养箱中培养；

4)    待细胞*贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的*培养基。

三、       注意事项

1.    在细胞培养过程中，请注意保持无菌操作；

2.    传代培养过程中，胰酶消化时间不宜过长，否则会影响细胞贴壁及其生长状态；

3.    该细胞只可用于科研。