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常见染色液的配制News

常见染色液的配制
发布时间:2018-01-23 点击次数:1515次

常见染色液的配制

实验步骤

 

  
一、吕氏(Loeffler)碱性美蓝染液 

  A液:美蓝(methylene blue) 0.6g

  95%酒精 30ml

  B液:KOH 0.01g

  蒸馏水 100ml

  分别配制A液和B液,配好后混合即可。

  
二、齐氏(Ziehl)石炭酸复红染色液

  A液:碱性复红(basic fuchsin) 0.3g

  95%酒精 10ml

  B液:石炭酸 5.0g

  蒸馏水 95ml

  将碱性复红在研钵中研磨后,逐渐加入95%酒精,继续研磨使其溶解,配成A液。

  将石炭酸溶解于水中,配成B液。

  混合A液及B液即成。通常可将此混合液稀释5—10倍使用,稀释液易变质失效,一次不宜多配。

  
三、革兰氏(Gram)染色液

  1.草酸铵结晶紫染液

  A液:结晶紫(crystal violet) 2g

  95%酒精 20ml

  B液:草酸铵(ammonium oxalate) 0.8g

  蒸馏水 80ml

  混合A、B二液,静置48小时后使用。

  2.卢戈氏(Lugol)碘液

  碘片 1.0g

  碘化钾 2.0g

  蒸馏水 300ml

  先将碘化钾溶解在少量水中,再将碘片溶解在碘化钾溶液中,待碘全溶后,加足水分即成。

  3.95%的酒精溶液。

  4.番红复染液

  番红(safranine O) 2.5g

  95%酒精 100ml

  取上述配好的番红酒精溶液10ml与80ml蒸馏水混匀即成。

  
四、芽孢染色液 

  1.孔雀绿染液

  孔雀绿(malachite green) 5g

  蒸馏水 100ml

  2.番红水溶液

  番红 0.5g

  蒸馏水 100ml

  3.苯酚品红溶液

  碱性品红 11g

  无水酒精 100ml

  制法取上述溶液10ml与100ml5%的苯酚溶液混合,过滤备用。

  4.黑色素(nigrosin)溶液

  水溶性黑色素 10g

  蒸馏水 100ml

  称取10g黑色素溶于100ml蒸馏水中,置沸水浴中30分钟后,滤纸过滤

  二次,补加水到100ml,加0.5ml甲醛,备用。

  
五、荚膜染色液 

  1.黑色素水溶液

  黑色素 5g

  蒸馏水 100ml

  福尔马林(40%甲醛) 0.5ml

  将黑色素在蒸馏水中煮沸5分钟,然后加入福尔马林作防腐剂。

  2.番红染液

  与革兰氏染液中番红复染液相同。

  
六、鞭毛染色液 

  A液:单宁酸 5g

  FeCl3 1.5g

  蒸馏水 100ml

  福尔马林(15%) 2.0ml

  NaOH(1%) 1.0ml

  配好后,当日使用,次日效果差,第三日则不宜使用。

  B液:AgNO3 2g

  蒸馏水 100ml

  待AgNO3溶解后,取出10ml备用,向其余的90mlAgNO3中滴入浓NH4ON,使之成为很浓厚的悬浮液,再继续滴加NH4OH,直到新形成的沉淀又重新刚刚溶解为止。再将备用的10mlAgNO3慢慢滴入,则出现薄雾,但轻轻摇动后,薄雾状沉淀又消失,再滴入AgNO3,直到摇动后仍呈现轻微而稳定的薄雾状沉淀为止。如所呈雾不重,此染剂可使用一周,如雾重,则银盐沉淀出,不宜使用。

 
 
七、富尔根氏核染色液

  1.席夫氏(Schiff)试剂

  将1g碱性复红加入200ml煮沸的蒸馏水中,振荡5分钟,冷至50℃左右过滤,再加入1mol/LHC120ml,摇匀。待冷至25℃时,加Na2S2O5(偏重亚硫酸钠)3g,摇匀后装在棕色瓶中,用黑纸包好,放置暗处过夜,此时试剂应为淡黄色(如为粉红色则不能用),再加中性活性炭过滤,滤液振荡1分钟后,再过滤,将此滤液置冷暗处备用(注意:过滤需在避光条件下进行)。

  在整个操作过程中所用的一切器皿都需十分洁净、干燥,以消除还原性物质。

  2.Schandium固定液

  A液:饱和升水溶液

  50ml升水溶液加95%酒精25ml混合即得。

  B液:冰醋酸

  取A液9毫升 B液1毫升,混匀后加热至60℃。

  3.亚硫酸水溶液

  10%偏重亚硫酸钠水溶液5ml,1mol/LHCl5ml,加蒸馏水100ml混合即得。

  
八、Bouin氏固定液 

  苦味酸饱和水溶液 75ml

  福尔马林(40%甲醛) 25ml

  冰醋酸 5ml

  1g苦味酸可制成75ml饱和水溶液。

  先将苦味酸溶解成水溶液,然后再加入福尔马林和冰醋酸摇匀即成。

  
九、乳酸石炭酸棉蓝染色液

  石炭酸 10g

  乳酸(比重1.21) 10ml

  甘油 20ml

  蒸馏水 10ml

  棉蓝(cottonblue) 0.02g

  将石炭酸加在蒸馏水中加热溶解,然后加入乳酸和甘油,zui后加入棉蓝,使其溶解即成。

  
十、瑞氏(Wright)染色液 

  瑞氏染料粉末 0.3g

  甘油 3ml

  甲醇 97ml

  将染料粉末置于干燥的乳缽内研磨,先加甘油,后加甲醇,放玻璃瓶中过夜,过滤即可。

  十一、美蓝(Levowitz-Weber)染液 (实验62)

  在52ml95%酒精和44ml四氯乙烷的三角烧瓶中,慢慢加入0.6g氯化美蓝(met hylene blue chloride),旋摇三角烧瓶,使其溶解。放5—10℃下,12—24小时,然后加入4ml冰醋酸。用质量好的滤纸如WhatmanNo.42或与之同质量的滤纸过滤。贮存于清洁的密闭容器内。


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