GIBCO中文版细胞培养手册

GIBCO中文版细胞培养手册

细胞培养简介 . 2
什么是细胞培养？ . 2
有限细胞系与连续细胞系 . 2
培养条件2
冻存 2
培养细胞的形态 3
细胞培养的应用 3
细胞培养实验室 4
安全 4
生物安全性等级 4
安全数据表 5
安全设备 5
个人防护设备 (PPE) . 5
实验室安全规范 5
细胞培养设备 . 6
基本设备 6
扩增设备  6
其他用品. 6
细胞培养实验室 . 7
无菌工作区域 . 7
细胞培养通风橱 7
细胞培养通风橱布局 . 8
培养箱 . 9
储存 9
低温储存 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .10
细胞计数器 10
无菌技术 11
简介 11
无菌工作区域 . 11
良好的个人卫生 11
无菌试剂和培养基 . 12
无菌操作12
无菌技术核对表 . 13
ii | 细胞培养基本知识
目录
生物污染 14
简介 14
细菌 . 14
酵母 15
霉菌 15
病毒 16
支原体 . 16
交叉污染 .17
抗生素的使用 . 17
细胞培养基本知识 18
细胞系 18
选择合适的细胞系 . 18
获取细胞系 18
培养环境 19
贴壁培养与悬浮培养 . 19
培养基 . 20
pH 值 . 21
二氧化碳 .21
温度 21
细胞形态 22
哺乳动物细胞 . 22
哺乳动物细胞形态差异 22
293 细胞的形态 . 23
昆虫细胞 24
Sf21 细胞的形态 24
Sf9 细胞的形态 25
方法 26
细胞培养维持指导原则 26
什么是传代？ . 26
何时传代？ 27
常用细胞系推荐使用培养基 28
贴壁细胞的解离 30
TrypLE. 解离酶 30
贴壁细胞的传代 . 31
所需材料 31
贴壁细胞传代流程 . 31
贴壁昆虫细胞传代的注意事项 32
细胞培养基本知识 | iii
目录
悬浮细胞的传代 . 33
悬浮细胞的传代 33
悬浮培养容器 . 33
所需材料 34
悬浮细胞传代流程 . 34
悬浮昆虫细胞传代的注意事项 36
细胞的冷冻 . 37
冻存 37
细胞冻存指导原则 . 37
冻存培养基 38
所需材料 38
培养细胞冻存方案 . 39
冷冻细胞的解冻 . 40
细胞解冻指导原则 . 40
所需材料40
冷冻细胞解冻方案 . 40
支持技术方案 . 41
利用血球计数器进行细胞计数 41
台盼蓝拒染法 . 42
浓缩细胞42
附录 43
疑难解析 43
细胞培养产品 . 44
细胞系 . 44
哺乳动物细胞培养基 . 45
昆虫细胞培养基 46
细胞培养用血清产品 . 46
细胞培养用实验试剂 . 47
抗生素和抗真菌剂 . 48
细胞培养用辅助产品 . 49
生长因子和纯化蛋白 . 49
转染和选择 50
转染试剂 51
其他资源 52
哺乳动物细胞和昆虫细胞培养 52
细胞与组织分析 52
转染选择工具 . 52
安全数据表 52
分析证书 52
53
iv | 细胞培