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猪圆环病毒通用PCR试剂盒

猪圆环病毒通用PCR试剂盒是群中等小的双股 DNA 病毒,根据其理化性质分 α、β、γ、未分类疱疹病毒四个亚科。疱疹病毒感染的宿主范围广泛,可感染人类和其他脊椎动物。在自然界广泛存在,主要侵犯外胚层发育而成的组织,例如:皮肤、粘膜和神经组织。

  • 产品型号:50次
  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2020-08-10
  • 访  问  量:295
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详细介绍
品牌其他品牌货号XY-0578
规格50T供货周期一周
主要用途荧光定量PCR具有更高的扩增效率、更高的扩增灵敏度、更高的扩增特异性。应用领域医疗卫生,环保,化工,生物产业,农业

猪圆环病毒通用PCR试剂盒

Porcine Circovirus(PCV)

产品及特点

猪圆环病毒(Porcine Circovirus,PCV)有 PCV-1 和 PCV-2 两种型,其 基因组为单链 DNA,长度分别为 1759nt 和 1768nt,其同源性低于 80%,但 基因组结构相似。PCV-1 无致病性,广泛存在于猪体内。PCV-2 对猪具有较强 的易感性,感染猪可自鼻液、粪便等废物中排出病毒,经口腔、呼吸道途径感 染不同年龄的猪。感染病毒后的病猪见的症状是猪只渐进性消瘦或生长迟 缓,这也是诊断所必需的临床依据,其他症状有厌食、精神沉郁、行动迟缓、 皮肤苍白、被毛蓬乱、呼吸困难,咳嗽为特征的呼吸障碍,较少发现的症状为 腹泻和中枢神经系统紊乱,一旦感染该病毒,发病率一般很低而病死率都很高, 对养猪业带来较大的经济损失,因此快速检测猪圆环病毒具有重要意义。本产 品是根据 PCR 原理开发检测猪圆环病毒通用的试剂盒,它具有下列特点

1. 即开即用,用户只需要提供 DNA 模板。

2. 引物经过精心优化,专一性强,只扩增猪圆环病毒,与其他病毒没有交叉 反应。

3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。

4. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。

5. 本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次,但只能用于科研。

猪圆环病毒通用PCR试剂盒规格及成分

编号

成分

规格

试剂一

PCR MagicMix 3.

1 mL(红盖)  

试剂二

超纯水

  1 mL(亮黄色))

试剂三

猪圆环病毒通用 PCR 引 物混合液

100 μL白盖) 

试剂四

猪圆环病毒通用 PCR 阳 性对照 (1×10E8 拷贝/μL)

50 μL(黄盖)

 

试剂

使用手册

1 份

运输及保存 低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。阳性对照需要单独放置,不要污染其 他试剂。 

自备试剂 样品 DNA。

使用方法 一、样品 DNA 的制备

1. 如果有 N 个样品,必须设置 N+2 个提取,多出的一个是 PC(样品制备阳 性对照),一个是 NC(样品制备阴性对照)。可以用 10μL 阳性对照的 1 千倍稀释液再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样,以此 作为 PC。另外用水作为 NC。

2. 用自选方法纯化样品的 DNA,本试剂盒跟市场上大多数寄生虫 DNA 提取 试剂盒兼容。 

二、设置 PCR 反应(40μL 体系)

3. 对 N+2 个样品,在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性 对照,故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分: 

成分

N+2

样品

PCR阴性对照

PCR阳性对照

PCR Magic Mix 3.0

各20 μL

20 μL

20 μL

猪圆环病毒通用PCR 引物 混合液 

各2 μL

2 μL

2 μL

 N+2 个样品 DNA 模板 各 18 μL  

PCR 阴性对照(水) 

 

18 μL

-

PCR 阳性对照(猪圆环病毒通用PCR 阳性对照的 10000 倍稀释液)

-

 

18 μL

4. 按下表设置 PCR 反应:

过程

温度

时间

预变性

95℃ 

5 min

PCR反应

(35个循环)

95℃ 

15 sec

59℃

15 sec

72℃

60 sec 

后延伸

72

10 min

 

三、电泳检测

5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在 扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳 性对照必须有 551bp 大小的条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实 验无效。对没有扩增产物的样品,可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。

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