细胞的活性鉴定在生物学和医学上具有很重要的意义。它是体外细胞培养技术中常用的一个检测指标。不同的细胞活性鉴定方法有各自不同具体的反应机理，但无论采用哪种方法，都利用了死细胞和活细胞在生理机能和性质上的差异。常用的方法有直接染色法，克隆形成试验，比色法等。下面我们就简单的了解一下常用的细胞活性检测方法的原理，特点，以及各自的优缺点。一、染色计数法化学染色法染色计数法是细胞培养中检查细胞死活zui常用的方法,直接利用死细胞和活细胞对染料的不同亲和力,检查细胞活性,能在光学显微镜下...

蛋白定量是生物学研究中不可能或缺的一个步骤，根据其目的可分为蛋白质的“总定量”和特定蛋白的“个别定量”。在蛋白质的提取、纯化和分析过程中，蛋白质的定量随处可见。比如在裂解细胞之后，应对各个样品中的蛋白进行定量，确保下游实验的数据平行度；在电泳之前进行定量，保证上样量一致，这样目的条带含量的变化才有说服力。蛋白质的结构复杂、功能各一、分子量存在巨大差异，目前还没有一个理想且通用的蛋白定分析方法。如今最常见的方法主要有以下几种：BCA法测定bicinchoninincacid01...

即使蛋白酶对细胞功能很重要，但你也有不想见到它们的时候。比如，在纯化蛋白质的时候，你可不想让蛋白酶大肆吞噬你的目标蛋白吧，特别是低丰度蛋白。如今，市场上有多种蛋白酶抑制剂可供选择，帮助你在必要时停止蛋白酶的活性。为了对付细胞和组织样品中存在的各种蛋白酶，抑制剂的选择也在不断增加。目前，主要有四种类型的蛋白酶，根据他们活性位点中的氨基酸命名：丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶和金属蛋白酶。蛋白酶抑制剂可以特异针对一种蛋白酶，也可以是广谱的。人们通常根据抑制剂作用的蛋白...

1.什么是感受态细胞（1）感受态细胞其实是一种暂时性改变一下细胞膜的通透性，以利于外源DNA（如质粒）进入细胞。这样的活细胞称为感受态细胞。（2）主要原理其实就是通过特殊的方法处理使细胞，使细胞膜的通透性变大，直观的说，使得细胞膜表面出现一些孔洞，便于外源DNA（如重组质粒或者运载体）进入感受态的细胞。2.感受态细胞制备原理在基因克隆技术中，转化特指将质粒DNA或以其为载体构建的重组DNA导入细菌体内，使之获得新的遗传特性的一种方法。它是微生物遗传、分子遗传、基因工程等研究领...

01电泳的发展简史1809国外物理学家Рейсе发现电泳现象1909将胶体离子在电场中的移动称为电泳1937创造了Tiselius电泳仪，建立了研究蛋白质的移动界面电泳方法，并证明了血清是由白蛋白及α、β、γ球蛋白组成的。1948Wieland和Fischer重新发展了以滤纸作为支持介质的电泳方法，对氨基酸的分离进行过研究。1950Durrum用纸电泳进行了各种蛋白质的分离以后，开创了利用各种固体物质(如各种滤纸、醋酸纤维素薄膜、琼脂凝胶、淀粉凝胶等)作为支持介质的区带电泳方...

对一个实验室新手来讲，提到ChIP，您可能没听过这个词，他的全称叫染色质免疫沉淀(ChromatinImmunoprecipitation),今天就带大家来学习一下CHIP实验的相关知识，咱们主要从CHIP的定义、原理、步骤以及应用以下几点给大家分析介绍，希望能帮助大家更好的做CHIP实验什么叫ChIP？染色质免疫沉淀（ChIP）用于分析基因组中特定染色体区域中组蛋白乙酰化状态的实验方法，被用来研究细胞内DNA与蛋白质相互作用。是目前确定与特定蛋白结合的基因组区域或确定与特定...

上面这张图，大家有没有一种熟悉的感觉，没错，就是你想的核酸提取实验流程图。相信大家作刚开始做为实验小白，刚进实验室时，学的第一个实验就是提质粒了。当时刚进实验室，看着师兄做实验的样子好酷呀！跟在师兄后面，认真的对每一步的步骤都做好笔记，后来才发现你只不过是做了一份手抄版的说明书。接下来的N年里，除了转化、涂板、挑单克隆、摇菌、提质粒、酶切、连接，此时此刻，只想有个提取质粒的机器人。因为做多了之后，你就会像个机器人一样，最后甚至连提取的原理都会遗忘了。所以，今天小编就来给大家讲...

一、细胞凋亡的形态学检测根据凋亡细胞固有的形态特征，人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法。1光学显微镜和倒置显微镜2荧光显微镜和共聚焦激光扫描显微镜3透射电子显微镜观察二、磷脂酰丝氨酸外翻分析（AnnexinV法）磷脂酰丝氨酸（Phosphatidylserine,PS）正常位于细胞膜的内侧，但在细胞凋亡的早期，PS可从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面，暴露在细胞外环境中(图3)。Annexin-V是一种分子量为35~36KD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白，能与PS高亲...

各位小伙伴们，我们又见面了好久没有更新一些技术性的文章了，今天我们就来讲讲蛋白质技术，对，没错，就是Western免疫印迹，这个实验相信各位小伙伴们，也是耳熟能详了，但是呢，还是有不少下伙伴们在实验过程中，会出现各种各样的问题，所以为了解惑各位小伙伴们，今天我们就出一期关于Western免疫印迹实验的知识点，其中包括它的概念、原理、应用场景、操作步骤以及注意事项等。Western免疫印迹是什么Western免疫印迹（WesternBlot）是将蛋白质转移到膜上，然后利用抗体进...

大家在养细胞的时候，想必大家也一定遇到过细胞状态差这种情况，但是细胞状态差，有很多种原因造成？细胞状态很差，常常出现的现象是：细胞边缘不清晰、细胞不饱满、折光性差、背景比较脏、黑点很多、细胞碎片多（细胞凋亡后的细胞碎片）、单个细胞内有空泡（凋亡）且空泡比较多；如果细胞出现老化，也就是细胞比较扁平、增殖减缓、细胞核体积增大、细胞突触变多，此时观察到的细胞状态也是不正常的。所以，除了考虑血清和细菌污染的问题，细胞老化也不容忽视~首先，我们要知道什么是细胞老化？何为细胞老化？188...