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  • 2017

    7-18

    多种细胞的培养方法HePG2细胞和L-02细胞的传代:HePG2细胞属人肝肿瘤的恒生细胞株,L-02细胞则是人胎肝细胞株,二者所使用的培养基可以是一样的,即zui常见的DMEM。一干使用低糖的。细胞长满培养瓶时既要传代。使用胰酶消化即可。用D-Hank's液配制成0.25%的胰酶。使用前37度预热,细胞经PBS清洗两遍后,每个中号培养瓶加0.7ml的胰酶,胰酶的量可根据自己培养瓶的大小而定,原则就是能够盖满瓶底。加入胰酶以后,为使酶的活性zui大,将培养瓶盖拧紧后放回培养箱中...

  • 2017

    7-7

    ChromatinImmunoprecipitation(ChIP)实验技术总结ChIP是一项比较流行的研究转录因子(transcriptionfactor,TF)与启动子(promoter)相互结合的实验技术。由于ChIP采用甲醛固定活细胞或者组织的方法,所以能比较真实的反映细胞内TF与Promoter的结合情况。当用甲醛处理时,相互靠近的蛋白与蛋白,蛋白与核酸(DNA或RNA)之间会产生共价键。细胞内,当TF与Promoter相互结合(生物意义上的结合)时,它们必然靠的比...

  • 2017

    7-7

    基因编辑技术CRISPR-Cas9工具让科学家几乎能随意改变基因组。人们称赞它比以往的技术明显更简单、更廉价及更通用。CRISPR-Cas9在各地的实验室中大放光彩,并带来了一些医学和基础研究的新应用。但该技术也有其局限性。美国加州大学圣地亚哥分校生物工程师PrashantMali指出,它擅长到基因组的一个特定位点,并在那里完成切割。“但有时候你感兴趣的应用还要多一点。”[Argonaute]今年年初,研究人员怀着热情扑向了一种名为NgAgo的新基因编辑系统。这也显示了他们对...

  • 2017

    6-22

    原代肝细胞培养方法总结1、肝细胞培养液的组成(以100ml培养液为例):DMEM90ml,10%胎牛血清10ml,肝细胞生长因子1-2ug,双抗(100乘)1ml,胰岛素500U/L、地塞米松0.4mg/L关于培养液添加内容的解释:肝细胞培养液中是否要添加肝细胞生长因子重组人肝细胞生长因子(r—hHGF)是zui强的促肝细胞分裂剂,在一定剂量范围内,r—hHGF与肝细胞DNA的合成有明显的量效关系。肝细胞生长因子的剂量问题:1ng/mlr-hHGF即可引起DNA合成显著增加;...

  • 2017

    6-22

    细胞冻存、解冻方法与细胞计数细胞冻存、解冻方法与细胞计数一、细胞冷冻保存1.材料:生长良好之培养细胞、新鲜培养基、DMSO(SigmaD-2650)、无菌塑料冷冻保存管(Nalgene5000-0020)、0.4%(w/v)trypanblue(GibcoBRL15250-061)、血球计数盘与盖玻片、等速降温机(KRYO10SeriesII)2、冷冻保存方法:(1)传统方法:冷存管置于4℃10分钟----20℃30分钟----80℃16~18小时(或隔夜)---液氮槽vap...

  • 2017

    6-7

    日前,中国药科大学科研人员在《中国野生植物资源》杂志上刊论文指出,以海南命名的*植物海南茄有护肝作用,可抑制肝硬化,并有抗氧化、抗慢性炎症和止痛作用。海南茄为茄科植物海南茄的全株,系茄科茄属的茄亚属,别名细颠茄、金钮头、卜谷雀、衫钮藤(儋州)等,《全国中草药汇编》则记载:海南茄别名为金耳环,耳环锤。民间常用海南茄治疗风湿性关节炎、酒精肝中毒、牙龈出血及虫蛇咬伤。海南茄为灌木,高1-2米,具黄土色基部宽扁的倒钩刺;叶卵形至长圆形;浆果球形;花期在春夏间,果期在秋冬间。据这篇名为...

  • 2017

    6-6

    贴壁细胞标准换液步骤一、准备工作1.废液缸2.吸管3.新鲜培养基4.油性记号笔/普通签字笔5.实验记录本二、实验步骤1.打开层流,打开层流间和超净台的紫外线灯,废液缸和吸管同时照射;2.把水浴锅调整到37℃并使其稳定;3.将新鲜培养基放置到水浴锅中,注意防止水面高于瓶肩,100ml液体保持10分钟,(200ml液体保持15分钟,500ml液体保持20分钟),间或摇动;4.着无菌服装,帽子,口罩和手套5.用75%乙醇消毒培养基瓶外壁,放置到超净台上;6.将细胞培养瓶取出,用75...

  • 2017

    6-6

    细胞传代准备工作3.1.1细胞传代所需培养液及试剂需提前放置于生物安全柜内预热至室温备用。3.1.2细胞传代材料,滴管、移液管、培养器皿、计数板、橡皮乳头。3.2细胞传代步骤3.2.1人无菌室之前用肥皂洗手,用75%酒精擦拭消毒双手。3.2.2细胞传代前先在倒置显微镜下观察细胞形态,确定细胞是否需要传代及细胞需要稀释的倍数观察。3.2.3打开超净工作台的紫外灯照射台面30min左右,关闭超净工作台的紫外灯,打开抽风机清洁空气,除去臭氧。3.2.4超净工作台面应整洁,用75%酒...

  • 2017

    6-5

    随着诺华(Novartis)和凯特(Kite)相继提交生物制品上市申请,美国FDA批准的CAR-T免疫细胞商业化疗法大概率会在2017年上市,有望带动新的细胞治疗热潮兴起。同时,越来越多的中国企业也在迈入免疫细胞治疗前沿战场。企业争抢先机在细胞治疗领域,多家医药公司纷纷发力,或与国外企业合作,或加速推进自主研究。今年1月,复星医药公告,投资不超过8000万美元与Kite成立合资公司,双方各占50%股权,开拓癌症T细胞免疫疗法市场。合资公司将获得KITE的KTE-C19在中国市...

  • 2017

    6-2

    精神分裂症是一种涉及广泛认知和情绪障碍的脑疾病,工作记忆受损一直是其关键的认知缺损标记。精神分裂症工作记忆的研究多采用言语或视觉空间的记忆材料。目前,对患者在动作材料为主的工作记忆上是否存在缺损还缺乏研究。研究发现,在编码和回忆阶段加入动作信息可显着提升日常工作记忆表现(比如对语音指令的记忆),但动作信息能否改善精神分裂症患者的工作记忆还有待研究。为弥补这一研究空白,中国科学院心理研究所心理健康重点实验室博士吕世裕、助理研究员杨天笑、研究员陈楚侨及合作者采用新颖的指令记忆广度...

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